[发明专利]一种猪小肠抗菌肽的制备方法

权利要求书

1.一种猪小肠抗菌肽的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1) 取猪小肠，去除猪小肠表面的筋膜、脂肪组织和小肠内容物，用水冲洗干净，然后将猪小肠在80-100℃的水中热处理至肠壁出现褶皱，热处理结束后置于冰水中冷却，冷却后用绞肉机绞碎，接着用胶体磨匀浆，得到猪小肠匀浆液；

2）将上述匀浆液与注射用水按照质量比100∶90-99混合均匀，然后将混合均匀后的匀浆液反复冻融5-6次；

3 将反复冻融后的匀浆液与乙酸按照质量比100∶1-10混合均匀，于4℃搅拌12小时后得到混合液，将混合液沸水浴8-15min，然后将混合液置于冰水中冷却，离心，分别收集沉淀物和一次上清液，将一次上清液于4℃保存；

4）将上述沉淀物与注射用水按照质量比1∶1.8-2.2混合均匀，于4℃搅拌12小时后得到浸提液，将浸提液在温度-10℃以下，冷冻2-4小时后离心，收集二次上清液体；

5）合并一次上清液和二次上清液，将合并后的上清液依次经过0.22-0.45 μm和5-10 kD滤膜进行切向流过滤，收集滤膜透过液，得到超滤液；调节超滤液pH值至5.0-7.2之间，再经0.1 μm-0.22 μm除菌滤器过滤，得到猪小肠抗菌肽。

2.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽的制备方法，其特征在于：所述步骤2），匀浆液与注射用水的质量比为100∶97.13。

3.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽的制备方法，其特征在于：所述步骤3），反复冻融后的匀浆液与乙酸的质量比为100∶2.87。

4.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽的制备方法，其特征在于：所述步骤3）， 混合液在搅拌条件下进行沸水浴。

5.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽的制备方法，其特征在于：所述步骤3），冷却后的混合液于4℃、6000-7500 r/min离心20-30 min。

6.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽的制备方法，其特征在于：所述步骤4），沉淀物与注射用水的质量比为1∶2.12。

7.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽的制备方法，其特征在于：所述步骤4），冷冻后的浸提液于4℃、6000-7500 r/min离心20-30 min。