[发明专利]一种半滑舌鳎养殖用饲料添加剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于饲料添加剂技术领域，具体涉及一种半滑舌鳎养殖用饲料添加剂的制备方法。

背景技术

微生态制剂，是指运用微生态学原理，利用对宿主有益无害的益生菌或益生菌的促生长物质，经特殊工艺制成的制剂，其活性物质包括活菌体、死菌体及其代谢产物。微生态制剂经口或者其他黏膜途径投放，旨在改善黏膜表面微生物或酶的动态平衡，或用于刺激特异性或非特异性免疫机制。目前，微生物添加剂己被应用于饲料、农业、医药保健和食品等各领域中。

芽孢杆菌属于好氧菌或兼性厌氧菌，在一定极端条件下会产生芽孢，从而具有耐高温、耐酸碱等特性；同时，一般芽孢杆菌制剂能够发挥生物夺氧作用，以维持胃肠道厌氧环境，并且通常能够和乳酸菌等厌氧菌混合使用，改善胃肠道环境；且芽孢杆菌在作用过程中可产生淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等多种酶类及氨基酸、维生素和促生长物质，促进水产生物对营养物质的消化吸收；并能够与致病菌发生拮抗作用，从而抑制致病菌的生长；能够促进淋巴细胞增殖及免疫球蛋白分泌，改善动物机体的免疫功能。

半滑舌鳎是海水养殖物，对水体环境的要求很高，幼苗的存活率低，个体的生长缓慢，且容易感染有害致病菌，产生疾病。目前半滑舌鳎的养殖多采取喂药养殖，即使用抗生素来抑制有害病菌的生长。但是长期使用抗生素不仅对半滑舌鳎的养殖造成危害，而且滥用抗生素产生的耐药菌对人类健康具有巨大的威胁。

发明内容

本发明的目的在于提供一种半滑舌鳎养殖用饲料添加剂的制备方法。所得半滑舌鳎养殖用饲料添加剂既能提高半滑舌鳎幼苗存活率，又能促进半滑舌鳎个体的成长，在半滑舌鳎养殖方面具有良好市场前景。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种半滑舌鳎养殖用饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

1）乳酸杆菌的扩大培养：将从试管斜面培养基中取出的乳酸杆菌单菌落接入到液体培养基中，然后置于揺床中，20℃、150-250r/min条件下培养3天；然后于对数期将所得乳酸杆菌培养液按1-3vol%的接种量接种到发酵培养基中进行发酵培养，发酵温度为20℃，发酵时间为24-48h；在所得发酵液中加入柠檬酸钠0.5-0.8vol %、NaCl 2-6vol %和黄原胶1-5 vol%，并调节pH至5-6，得乳酸杆菌液体制剂；

2）芽孢杆菌的扩大培养：将从固体培养基中取出的芽孢杆菌单菌落接入到液体培养基中，然后置于揺床中，15℃、150-250r/min条件下培养3天；然后于对数期将所得芽孢杆菌培养液按3-5vol%的接种量接种到发酵培养基中进行发酵培养，发酵温度为15℃，发酵时间为24-48h，得芽孢杆菌液体制剂；

3）复配：将步骤1）、2）所得乳酸杆菌液体制剂、芽孢杆菌液体制剂按体积比1-3:2（优选1:2）混合，制得所述半滑舌鳎养殖用饲料添加剂。

步骤1）中所述液体培养基的原料配方为：每1000mL蒸馏水中含：酪蛋白胨8-12g、牛肉提取物10-12g、酵母提取物5-8g、葡萄糖5-6g、乙酸钠5-6g、柠檬酸二铵2-4g、吐温80 1-2g、磷酸氢二钾2-4g、七水硫酸镁0.2-0.6g、一水硫酸锰0.03-0.05g、碳酸钙20-22g；

所述发酵培养基的原料配方为：每1000mL蒸馏水中含：蛋白胨5-8g、酵母粉1-3g。

步骤2）中所述液体培养基的原料配方为：每1000mL无菌水中含：蛋白胨5-8g、酵母粉1-3g、柠檬酸铁0.1-0.3g、氯化钠18-20g、氯化镁5-6g、氯化钙1.5-2.0g；

所述发酵培养基的原料配方为：每1000mL蒸馏水中含：蛋白胨5-10g、酵母粉1-3g。

所述半滑舌鳎养殖用饲料添加剂的应用方法为，按饲料重量的1-3%称取半滑舌鳎养殖用饲料添加剂，将其与饲料混合后泼洒进半滑舌鳎养殖池进行饲养。

本发明的有益效果在于：本发明所得半滑舌鳎养殖用饲料添加剂可直接投入养殖水体中，并可以降低水体中有害病菌的生长，帮助半滑舌鳎对营养物质进行消化吸收，从而显著提高半滑舌鳎的增重率以及幼苗的存活率，且该饲料添加剂稳定性良好，可以长期储存。

具体实施方式

为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。

实施例1 乳酸杆菌液体制剂的制备