[发明专利]一种橡胶树开花调控基因HbFT2及其克隆与应用有效
申请号: | 201710324233.0 | 申请日: | 2017-05-10 |
公开(公告)号: | CN107119057B | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
发明(设计)人: | 李季;毕政鸿;黄天带;华玉伟;黄华孙 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院橡胶研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;C12N15/10;A01H6/38 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 蒋常雪 |
地址: | 57173*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 橡胶树 开花调控 基因 克隆 基因工程技术 巴西橡胶树 核苷酸序列 特异性表达 基因组织 全长cDNA 应用 分析 | ||
1.一种橡胶树开花调控基因HbFT2,其特征在于,所述基因HbFT2的cDNA核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。
2.一种权利要求1所述的橡胶树开花调控基因HbFT2编码的蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID No:2所示。
3.一种橡胶树开花调控基因HbFT2,其特征在于,所述基因HbFT2的基因组DNA核苷酸序列如SEQ ID No:3所示。
4.一种含有权利要求1或3所述的橡胶树开花调控基因HbFT2的重组植物表达载体,其特征在于,所述表达载体为重组质粒pXCS-HbFT2。
5.根据权利要求4所述的重组植物表达载体,其特征在于,所述重组植物表达载体中的载体为pMD19-T载体。
6.一种克隆权利要求1或3所述的橡胶树开花调控基因HbFT2的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)分别以巴西橡胶树的叶片基因组DNA,或者叶片和花序的cDNA混合为模板,设计如下引物进行PCR扩增,获得HbTF1基因开放阅读框;HbFT2OF:
GGAATTCATGCCTAGAGATCCTCTGGTT;HbFT2OR:
CCCCCCGGGTTGTCCTCGCCTTCTT;
(2)以HbTF1基因开放阅读框为基础,设计如下引物合成5’UTR及3’UTR;HbFT2-5UF:
TGGAAAGCATATTGGCATAGAAAGT;HbFT2-5UR:
CCTTAAATCATCTCCACCTACATCA;HbFT2-GSP31st:
CGAAGACAGACAATCAACCCACC;HbFT2-GSP32nd:
GAAACTGCTGCAAGAAGACGCTAAC;
(3)根据5’UTR和3’UTR的获得,设计如下特异引物,进行目标基因HbFT2全长的扩增;HbFT2-F:TGGAAAGCATATTGGCATAGAAAGT;HbFT2-R:
GCATAATTATACTTGTATATCTTTTAAATTTATTTGTATAT。
7.权利要求1或3所述的橡胶树开花调控基因HbFT2用于制备促进橡胶树提前开花的促进剂的应用。
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