[发明专利]鉴定棉花闭花授粉材料的引物对、试剂盒以及方法有效

申请号：	201710324855.3	申请日：	2017-05-10
公开（公告）号：	CN107142308B	公开（公告）日：	2020-11-06
发明（设计）人：	李威;杨代刚;马雄风;裴小雨;刘艳改;张飞;贺昆仑;孙宽;王振玉;周晓箭;周克海;张文生	申请（专利权）人：	中国农业科学院棉花研究所
主分类号：	C12Q1/6895	分类号：	C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11;G01N33/00
代理公司：	北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371	代理人：	李进
地址：	45500***	国省代码：	河南;41
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摘要：
搜索关键词：	鉴定棉花授粉材料引物试剂盒以及方法
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【权利要求书】：

1.鉴定棉花闭花授粉材料的引物对，其特征在于，包括以下引物对中的全部；

NAU2173引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示，NAU2343引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示，NAU7024引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示，TMB1638引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示，BNL3875引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示，HAU0979引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示，NAU1102引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.13和SEQ ID No.14所示，NAU6601引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.15和SEQ ID No.16所示，NAU2251引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.17和SEQ ID No.18所示，DPL0133引物对的上下游核酸序列如SEQ ID No.19和SEQ ID No.20所示；

所述棉花闭花授粉材料为棉花闭花授粉材料CJ1548143。

2.鉴定棉花闭花授粉材料的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1中所述的引物对；所述棉花闭花授粉材料为棉花闭花授粉材料CJ1548143。

3.鉴定棉花闭花授粉材料的方法，其特征在于，采用权利要求1所述的引物对，对待检测棉花材料的基因组进行检测；所述棉花闭花授粉材料为棉花闭花授粉材料CJ1548143。

4.根据权利要求3所述的鉴定棉花闭花授粉材料的方法，其特征在于，所述检测为PCR检测。

5.根据权利要求4所述的鉴定棉花闭花授粉材料的方法，其特征在于，所述PCR检测时，PCR扩增所用的退火温度为58±1℃。

6.根据权利要求4所述的鉴定棉花闭花授粉材料的方法，其特征在于，所述PCR检测时，PCR扩增产物采用毛细管电泳检测结果。

7.根据权利要求4所述的鉴定棉花闭花授粉材料的方法，其特征在于，所述PCR检测所用的PCR反应体系为10-25μL。

8.根据权利要求7所述的鉴定棉花闭花授粉材料的方法，其特征在于，所述PCR反应体系中的模板DNA的含量为20-50ng。

9.根据权利要求3-8任一项所述的鉴定棉花闭花授粉材料的方法，其特征在于，待检测棉花材料的基因组所用的提取材料为待检测棉花材料的种仁。

10.一种鉴定棉花闭花授粉材料CJ1548143的方法，其特征在于，若待检测棉花材料的花朵开花当天花瓣紧闭，散粉正常，并且花粉活性正常，则判断为棉花闭花授粉材料；

进一步采用权利要求3-9所述的方法鉴定棉花闭花授粉材料，对待检测棉花材料的基因组进行检测；

判断所述棉花闭花授粉材料为棉花闭花授粉材料CJ1548143。