[发明专利]一种环烯醚萜苷假模板分子印迹聚合物及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种环烯醚萜苷假模板分子印迹聚合物及其制备方法与应用，解决了现有技术中模板泄露和模板分子价格昂贵的问题，制备方法包括以下步骤：1)以环烯醚萜苷类似物4‑苯基‑D‑吡喃葡萄糖苷为假模板，将假模板、功能单体、交联剂、引发剂和制孔剂加入反应釜中混合，超声脱气和充氮除氧后，恒温聚合，得到带有假模板分子的聚合物；2)将步骤1)中制备的带有假模板分子的聚合物研磨、清洗除去模板分子，得到留有分子印迹孔穴的分子印迹聚合物颗粒。

技术领域

本发明属于分离分析技术领域，具体涉及一种环烯醚萜苷假模板分子印迹聚合物及其制备方法与应用。

技术背景

现代化的中药质量评价模式是确保中药质量及其疗效的关键所在。由于中药多组分、多靶点的特点，单一指标性成分测定已不能适应建立现代化中药质量评价模式的要求。以中国药典为例，2010版药典选用丹参酮ⅡA、盐酸小檗碱、马钱苷作为丹参、功劳木、山茱萸及其复方制剂(如六味地黄丸、杞菊地黄丸、知柏地黄丸和桂附地黄丸等)的指标成分，而2015版中国药典则变更增选丹参酮ⅡA、隐丹参酮与丹参酮Ⅰ总量作为丹参质量控制标准，增选非洲防己碱、药根碱、巴马汀和小檗碱总量作为功劳木指标成分，增选马钱苷、莫诺苷作为山茱萸及其方剂质量控制标准。药效组分群质量评价模式替代单组分质量评价模式已成为中药质量评价方法的发展趋势。

环烯醚萜苷类“药效组分群”广泛共存于玄参科、茜草科、唇形科、龙胆科、马鞭草科等双子叶植物中，具有抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗氧化、抗病毒、降血糖、治疗白血病、防治心脑血管疾病等多种生物活性，常作为栀子、龙胆、山茱萸等药材及其复方制剂的质量控制指示性成分。环烯醚萜苷化学结构相近且基体复杂，如山茱萸复方制剂六味地黄丸中环烯醚萜苷类成分包括马钱苷、莫诺苷、甲氧基莫诺苷、断氧化马钱苷、獐牙菜苷、山茱萸苷等。六味地黄丸由熟地黄、山茱英制、牡丹皮、山药、获答、泽泻等六味中药组合而成的，作为滋阴补肾的中药，临床效果甚佳。2015版中国药典中选马钱苷和莫诺苷总量作为六味地黄丸质量控制标准，并且在成方制剂和单味制剂中的六味地黄丸，要求每丸含酒萸肉以莫诺苷(C₁₇H₂₆O₁₁)和马钱苷(C₁₇H₂₆O₁₀)的总量计，不得少于0.37mg。粗提液及混合对照品HPLC色谱图所示，中药或方剂中相近保留时间化学成分的“峰重叠”制约了样品中的色谱峰识别。复杂基质下药效组分群的快速靶向富集已成为中药质量评价的关键问题之一。加强高极性药效组分群分离基础研究，利于突破中药复杂样品物质分离瓶颈，为中药质量评价模式的制定提供理论依据。

分子印迹技术能够制备“预构化”的分子印迹聚合物(MIPs)，MIPs对于目标分子具有特异识别性。因MIPs材料极高的选择性及卓越的分子识别性能，很快在固相萃取、手性拆分、生物传感器等方面得到了广泛的应用。分子印迹-固相萃取技术将MIPs用作固相萃取填料从样品中纯化、富集目标分子及其结构类似物，能够克服分析过程中因基质复杂所带来的内源性干扰难题，在中药及其制剂质量控制方向展现出极大应用前景。分子印迹对于在天然产物中含量低、药效高的成分的鉴定分析和分离纯化提供了方法借鉴，但是其特异选择性有待提高。

目前环烯醚萜苷分子印迹聚合物分别由专利201510861116.9、201610542765.7和201611121434.2制得。传统环烯醚萜苷分子印迹聚合物均以京尼平苷等环烯醚萜苷为模板制备。该方法面临着一些技术上的挑战。首先，模板泄漏(template bleeding)问题便是其中之一。由于在传统的MIP合成中使用大量目标分子作为模板分子，MIP的网络交联度很高，模板分子完全去除比较困难，即使经过有机溶剂的反复洗脱，仍然会存在模板残留的问题。这样的MIP作为填充材料应用于微痕量物质的分析检测与提取时，模板分子会缓慢地释放到样品中，从而引起样品污染，并降低分析的精确度和准确度。其次，模板分子环烯醚萜苷价格昂贵，制约了环烯醚萜苷分子印迹聚合物的大规模制备。

发明内容