[发明专利]一种超声波辅助制备羧甲基茯苓多糖（CMP）的新方法

说明书

本发明公开了一种超声波辅助制备羧甲基茯苓多糖（CMP）的新方法，属于多糖制备技术领域。其主要过程是通过控制超声功率，超声时间，超声温度以及料液比，将茯苓粉分散于乙醇水溶液中，于超声波提取仪中溶胀，溶胀完成后，经过碱化、醚化、调pH、洗涤、干燥，得到溶解度、取代度更佳的羧甲基茯苓多糖。本发明研究了不同超声波条件对羧甲基茯苓多糖取代度和溶解度的影响，相比传统的制备方法，本发明可以有效地提高羧甲基化效率，增加产物的溶解度，并且不改变多糖结构。

技术领域

本发明涉及一种超声波辅助制备羧甲基茯苓多糖（CMP）的新方法，属于高分子多糖制备技术领域。

背景技术

由于天然存在的茯苓多糖水溶性差，临床应用上受到限制，可通过化学修饰，提高糖链的负电性，进而增加或赋予茯苓多糖的抗肿瘤、抗氧化等生物活性。羧甲基化是常用的多糖修饰方法，经过羧甲基化修饰后的茯苓多糖，其物理特性得到相应改善 (取代度、溶解性、粘度、电负性等)，同时生物活性进一步提高。

超声波是一种振动频率在20 KHZ-50 KHZ的机械振动波，是通过所产生的空化效应、振动作用等对天然产物有效成分进行提取的一种可行手段。超声波在多糖提取技术领域的研究居多，申请号CN201610770884.8（马齿苋多糖的提取方法）中提到利用超声波技术提取马齿苋多糖，所得多糖得率提高。申请号CN201611101889.8（金花茶花多糖的超声波提取方法）中将金花茶溶液加入到超声波提取器中，显著提高了多糖得率和抗氧化活性。申请号CN201510822152.4（一种茯苓中多糖的提取工艺）中提到，利用超声波辅助提取茯苓多糖的方法，工艺步骤简单，耗时短，并具有推广应用的价值。超声波技术在多糖提取中的应用已经取得了诸多成效，然而在多糖的取代方面，却应用甚少。目前，在羧甲基茯苓多糖的制备整个过程中，从头至尾仍旧沿用传统的反应设备，反应效率低，羧甲基化程度低，如Hamuro等人（1971）利用液固相震荡设备制备CMP，需要大量的有机溶剂作为反应介质，且生产成本高，反应效率低；如申请号CN200710053548.2（羧甲基茯苓多糖的工业化生产）中，在制备CMP过程中，采用搅拌方式进行连续化反应，工艺过程复杂，在反应前处理阶段需要95%的酒精浸提16 h，耗时费力；随着超声波技术的广泛应用，也有研究利用超声波技术制备改性多糖，如申请号CN200810120231.0（一种取代茯苓多糖的合成方法）中，虽然引入了超声波辅助制备取代茯苓多糖，但是却并未有很好的效果，该方法存在有机溶剂和反应试剂用量高，羧甲基效率低等问题。

发明内容

针对现有制备方法存在的缺陷，本发明旨在提供一种行之有效地制备方法，利用超声波技术辅助制备羧甲基茯苓多糖。

为实现以上目的，本发明提供的技术方案如下：

将去皮切片干燥后过60～100目的茯苓粉分散于55%～85%的乙醇体系中，于超声波提取仪中溶胀；溶胀完成后，加入茯苓粉干重50%～90%的氢氧化钠，50℃～70℃水浴锅内反应0.5h～1.5h，然后依次加入茯苓粉干重70%～95%氯乙酸和50%～90%的氢氧化钠，50℃～70℃水浴锅内反应3h～7h，冷却至室温，用冰醋酸调节pH值至5～6，抽滤；用55%～85%乙醇溶液洗涤固体部分，直至硝酸银检测无白色沉淀；烘干，粉碎可得CMP。

作为本发明的进一步方案，所述超声波的超声功率为24 W-120 W。

作为本发明的进一步方案，所述超声波的超声时间为10 min-40 min。

作为本发明的进一步方案，所述超声波的超声温度为30 ℃-70 ℃。

作为本发明的进一步方案，所述茯苓粉与85%乙醇溶液（g:mL）为1:4-1:8。

作为本发明的进一步方案，所述碱化和醚化的反应方式为搅拌。

具有工艺流程如图1所示。

本发明所述的制备方法，有益之处在于：