[发明专利]一种海南龙血树查尔酮异构酶DcCHIL1及其编码基因和应用有效
| 申请号： | 201710334743.6 | 申请日： | 2017-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN107190016B | 公开（公告）日： | 2019-10-18 |
| 发明（设计）人： | 朱家红;赵婉;梅文莉;戴好富;彭世清;王辉 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/61 | 分类号： | C12N15/61;C12N9/90;C12N15/10;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人： | 吕学文;朱红涛 |
| 地址： | 571101 *** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 海南 龙血树查尔酮异构酶 dcchil1 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种海南龙血树查尔酮异构酶基因DcCHIL1，其特征在于，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
2.一种海南龙血树查尔酮异构酶DcCHIL1，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.权利要求1所述的海南龙血树查尔酮异构酶基因DcCHIL1的克隆方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1)设计特异引物P1正向引物和P2反向引物；
(2)以海南龙血树茎干第一链cDNA为模板对DcCHIL1基因的CDS序列进行PCR扩增；
(3)将扩增获得的PCR产物连接pMD18-T载体，转化大肠杆菌感受态细胞，筛选阳性克隆并测序。
4.根据权利要求3所述的克隆方法，其特征在于，步骤(1)中所述的P1正向引物的序列如SEQ ID NO:3所示，所述P2反向引物的序列如SEQ ID NO:4所示。
5.根据权利要求3所述的克隆方法，其特征在于，步骤(2)中所述的PCR扩增 条件为：94℃预变性5min；94℃变性30sec，55℃退火30sec，70℃延伸1min，共35个循环；70℃延伸8min。
6.一种重组表达载体或表达盒，其特征在于，所述重组表达载体或表达盒含有如权利要求1所述的海南龙血树查尔酮异构酶基因DcCHIL1。
7.一种转基因细胞系或重组菌，其特征在于，所述转基因细胞系或重组菌含有如权利要求1所述的海南龙血树查尔酮异构酶基因DcCHIL1。
8.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有如权利要求1所述的海南龙血树查尔酮异构酶基因DcCHIL1。
9.权利要求1所述的海南龙血树查尔酮异构酶基因DcCHIL1的应用，其特征在于，将该基因应用于真核或原核表达。
10.权利要求1所述的海南龙血树查尔酮异构酶基因DcCHIL1的应用，其特征在于，将该基因通过转基因技术用于提高海南龙血树类黄酮积累和血竭的产量。
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