[发明专利]氧化性修饰改善细胞穿透性胜肽的成药性以作为药物载体

说明书

本发明提供一种经由氧化性修饰所得的细胞穿透性胜肽二聚体，藉由双硫键将两单体连接而成。本发明的有益效果是，该二聚体可通过增强胜肽载体的稳定性、降低其被酵素水解的速率、保持细胞穿透能力及增加硫酸乙酰肝素的结合专一性与结合力来增加胜肽的成药性。此经修饰的胜肽可作为适合的药物载体来传递药物，以应用于标靶治疗。

技术领域

本发明系关于一种经氧化修饰所产生的细胞穿透性胜肽二聚体，特别是关于一种通过双硫键连接的细胞穿透性胜肽二聚体。此二聚体改善原有的细胞穿透性胜肽的特性，尤其是应用于药物载体时所产生的药物安定性问题，所导致的成药性障碍。

背景技术

目前在癌症治疗的化学疗法中，常产生严重的不良副作用，乃是因药物对癌细胞和正常细胞不具辨识度，无选择性的攻击，因而导致药物疗效区间(therapeutic window)范围狭小，更损及临床预后结果(prognosis)。为了降低对正常组织的危害，用于抗癌的化学治疗常常给予未达标准的治疗剂量，导致治疗效果不全然达到预期的效果。为了克服这些挑战，标靶药物传递系统应运而生，藉由专一性的特定细胞结合能力，药物功效得以改善并降低副作用。时至今日，研究显示，除单株抗体外，胜肽、蛋白质及小分子皆有可能作为载体，与药物结合形成载体-药物复合物，能选择性地将药物带至特定受体异常表现的癌细胞。然而，截至目前为止，尚未有任何利用胜肽所形成的载体-药物复合物成功地上市。这可能归咎于许多原因，包含(a) 发现能匹配特定细胞表面标靶受体(targeted receptor)的适当配体(ligand)的工程巨大；(b)缺乏配体被细胞吸收与胞内排除等机转的相关研究信息；及(c)关于此类复合物的物理、化学性质与传输特性等系统性研究十分有限。

近期，有一种新型态细胞穿透性胜肽(CPP)的发现，已针对上述诸多问题，贡献可能的解决方案。此种胜肽CPP_ecp，衍生自人类嗜酸性阳离子蛋白质的特定氨基酸序列[ECP(32-41)]。之前已被证明位于CPP_ecp的特定内部结构区域(motif)具有肝素或硫酸乙酰肝素的结合能力，且CPP_ecp同时展现低细胞毒性与适度的癌细胞转移抑制性，并通过巨胞饮作用(macropinocytosis)而达到其优越的细胞穿透性功效。这些功能特性也同步宣告CPP_ecp可能作为治疗用的药物载体。

然而，一般而言，自然存在的胜肽在循环血清中通常具有相对较短的半衰期，低穿透性及代谢不稳定性，导致其在组织中的滞留时间是有限且短暂的。即使CPP_ecp被证明具有高度的穿透性，考虑药物吸收、分布、代谢和排泄(ADME)等诸多议题，低半衰期仍是使其成为成功的药物载体的巨大挑战。在本发明中，透过加强胜肽载体的稳定性、降低其被酵素水解的速率、保持穿透性及增加其对于硫酸乙酰肝素的选择性结合活性，发展出改善胜肽成药性的策略。

在上述发明背景说明段落中所揭露的内容，仅为增进对本发明的背景技术的了解，因此，上述的内容含有不构成阻碍本发明的先前技术，且应为本领域习知技艺者所熟知。

发明内容

本发明提供一种用于改善细胞穿透性胜肽的胜肽成药性的概念，此细胞穿透性胜肽称为CPP_ecp，其具有后述的序列：NYBX₁BX₂BNQX₃，其中B代表碱性氨基酸，X₁代表带有芳香基、疏水性或不带电的侧链的氨基酸，X₂代表半胱氨酸（Cysteine），及X₃代表天门冬酰胺（Asparagine）或不存在。

本发明更提供一种氧化性修饰的策略，通过加强胜肽稳定性、降低其被酵素水解的速率、保持穿透性及增加其对于硫酸乙酰肝素的选择性结合活性，进而改善胜肽应用于药物载体的成药性。