[发明专利]一种大鼠肺细胞纤维化模型在审
申请号: | 201710343205.3 | 申请日: | 2017-05-16 |
公开(公告)号: | CN107115343A | 公开(公告)日: | 2017-09-01 |
发明(设计)人: | 陈皓;王毅;姜文兵;陈晓曙;吴悠扬;林伟;朱宁;胡逸人;李林锦 | 申请(专利权)人: | 温州市人民医院 |
主分类号: | A61K31/4174 | 分类号: | A61K31/4174;A61K31/343;A61K31/661;A61K31/4245;A61P11/00 |
代理公司: | 浙江纳祺律师事务所33257 | 代理人: | 朱德宝 |
地址: | 325000 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大鼠 细胞 纤维化 模型 | ||
1.一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:建立方法如下:将大鼠进行称重,随机分为给药组和对照组,腹腔注射麻药进行麻醉,将其放于笼中,让其自然晕倒,对于给药组采用加样枪通过鼻腔给药的方式给于药品,所述药品中含有胺碘酮和盐酸萘甲唑啉,给药的过程中观察小鼠的呼吸情况,给药结束,让大鼠继续生长20-30天;对于对照组采用加样枪通过鼻腔给药的方式给于等体积0.9%氯化钠注射液,给样的过程中观察小鼠的呼吸情况,给样结束,让大鼠继续生长20-30天;然后给药组和对照组用戊巴比妥钠麻醉处死大鼠,迅速开胸,取出肺脏,部分用于制作组织切片,部分速冻于液氮备作羟脯氨酸含量测定。
2.根据权利要求1所述的一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:所述药品中胺碘酮和盐酸萘甲唑啉浓度分别为3-5mg/ml和0.03-0.06mg/ml。
3.根据权利要求2所述的一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:所述药品中含有浓度为5-10μM的1-磷酸鞘氨醇和1-5μM的激动剂SEW2871。
4.根据权利要求3所述的一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:所述胺碘酮的给药量为3-5mg/kg体重。
5.根据权利要求4所述的一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:所述加样枪通过鼻腔给药的方式给于药品具体操作过程如下:将大鼠脖颈处毛发剔除,准备一个口部边沿带弹性紧固带的透明塑料袋,将所述透明塑料袋套在大鼠头部,使所述透明塑料袋口部边沿的弹性紧固带套设在大鼠脖颈处,在透明塑料袋上设置两个洞,其中一个洞中插入导气管,所述导气管另一端连接有三通阀,所述三通阀一端和抽气泵相连,还有一端和吹气泵相连,另一个洞中插入软质导药管,所述导药管一端和加样枪的针头相连,另一端和大鼠一侧鼻孔相连,所述导气管和导药管外侧壁与透明塑料袋相接处无缝贴合;在大鼠晕倒后,使大鼠呈仰卧位状以弹力固定夹将其四肢分别固定于鼠板上;给药步骤如下,首先打开抽气泵和吹气泵,操作者一手控制三通阀,另一手控制注射器,注射器内装定量药品,先让抽气泵和导气管相通将透明塑料袋中空气抽出,保持3-5s,迅速切换三通阀使吹气泵和导气管相连,与此同时,迅速推注药品100-200μl进入鼻腔内,使药物随大鼠吸气时的气流充分进入支气管内,推注完毕后,保持5-10s,重复上述给药步骤若干次,解除鼠四肢弹力固定夹将鼠放回鼠笼内待复苏,然后置于恒温动物房饲养。
6.根据权利要求1-5任一项所述的一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:所述加样枪的加样速度为15-30μL/min。
7.根据权利要求6所述的一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:鼻腔给药后将小鼠直立旋转2-3min,利用体位及重力作用,尽量使药液在两侧肺内均匀分布。
8.根据权利要求6所述的一种大鼠肺细胞纤维化模型,其特征在于:鼻腔给药时把鼠板竖起与桌面成70-80°夹角,然后向右倾斜与桌面成60-70°夹角,将药品吹入单侧肺中。
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