[发明专利]一种酶法处理麦芽糊精制备分支环糊精的方法及其应用

权利要求书

1.一种酶法处理麦芽糊精制备分支环糊精的方法，其特征在于所述方法包括如下具体步骤：

(1)将麦芽糊精溶于磷酸盐缓冲液中，加入0.36U的CGTase酶反应12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步骤(2)的反应体系中加入0.72U糖化酶反应12-24h，高温灭酶，可制得分支环糊精。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述磷酸盐缓冲液的pH在3.5-8.0。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述麦芽糊精的质量浓度为1％-5％。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)中所述物理方法为70-100℃水浴加热。

5.一种权利要求1所述酶法处理麦芽糊精制备分支环糊精的方法的应用，其特征在于所述方法可用于制备葡萄糖基-α-环糊精、葡萄糖基-β-环糊精、葡萄糖基-γ-环糊精。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于用于制备葡萄糖基-α-环糊精时，具体步骤为：

(1)将麦芽糊精溶于磷酸盐缓冲液中，加入0.36U的α-CGTase酶反应12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步骤(2)的反应体系中加入0.72U糖化酶反应12-24h，高温灭酶，可制得含有葡萄糖基-α-环糊精的混合物；

(4)利用高效液相的方法对步骤(3)所得到的混合物进行分离纯化，最终制得所述葡萄糖基-α-环糊精；

所述磷酸盐缓冲液的pH在3.5-8.0；所述麦芽糊精的质量浓度为1％-5％；所述物理方法为70-100℃水浴加热。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于用于制备葡萄糖基-β-环糊精时，具体步骤为：

(1)将麦芽糊精溶于磷酸盐缓冲液中，加入β-CGTase酶反应12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步骤(2)的反应体系中加入糖化酶反应12-24h，高温灭酶，可制得含有葡萄糖基-β-环糊精的混合物；

(4)利用高效液相的方法对步骤(3)所得到的混合物进行分离纯化，最终制得所述葡萄糖基-β-环糊精；

所述磷酸盐缓冲液的pH在3.5-8.0；所述麦芽糊精的质量浓度为1％-5％；所述物理方法为70-100℃水浴加热。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于用于制备葡萄糖基-γ-环糊精时，具体步骤为：

(1)将麦芽糊精溶于磷酸盐缓冲液中，加入0.36U的γ-CGTase酶反应12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步骤(2)的反应体系中加入0.72U糖化酶反应12-24h，高温灭酶，可制得含有葡萄糖基-γ-环糊精的混合物；

(4)利用高效液相的方法对步骤(3)所得到的混合物进行分离纯化，最终制得所述葡萄糖基-γ-环糊精；

所述磷酸盐缓冲液的pH在3.5-8.0；所述麦芽糊精的质量浓度为1％-5％；所述物理方法为70-100℃水浴加热。

9.一种权利要求1所述酶法处理麦芽糊精制备分支环糊精的方法的应用，其特征在于所述方法可用于普 鲁兰酶逆向合成法制备单一分支环糊精；具体步骤为：

(1)取通过普鲁兰酶逆向合成方法制备得到的含分支环糊精的混合物粉末，溶于pH4.5磷酸盐缓冲液中；

(2)将步骤(1)所得溶液置于0℃-20℃条件下，结晶12-24h；

(3)将步骤(2)所得溶液离心，取上清液加入pH4.5缓冲溶液中，充分溶解；

(4)向反应体系中同时加入CGTase和糖化酶，45℃的条件下反应1-10h；

(5)通过膜分离的方法对步骤(4)的反应产物进行分离纯化，即得所述单一分支环糊精；

所述单一分支环糊精为葡萄糖基-α-环糊精、葡萄糖基-β-环糊精、葡萄糖基-γ-环糊精、麦芽糖基-α-环糊精、麦芽糖基-β-环糊精、麦芽糖基-γ-环糊精、半乳糖基-α-环糊精、半乳糖基-β-环糊精、半乳糖基-γ-环糊精中的一种。