[发明专利]一种沼泽小叶桦离体芽快繁方法

权利要求书

1.一种沼泽小叶桦的离体芽快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）挑选株高1~1.5 m的未萌动的健壮植株，4~5月份采主枝顶芽、主枝侧芽、侧枝顶芽的新生芽作为外植体；

2）在超净工作台上，先用70%的酒精处理外植体20 s，再用0.1%升汞消毒5~20 min，10% NaClO消毒0~20 min，用无菌水冲洗数次；

3）将处理好的外植体在无菌的条件下接种到初代培养基上，初代培养基成分为：MS +0.6~1.5mg/L 6-BA +0.5~1.0 g/L PVP，培养20d以上；

4）将外植体转入增殖培养基，增殖培养基成分为：MS +0.4~0.6 mg/L 6-BA + 0.02 mg/L NAA，培养时间20d以上获得小苗；

5）将小苗进行生根培养，生根培养基成分：MS + 0.1~0.5 mg/L NAA，或1/2MS + 0~0.5 mg/L NAA，培养20d以上；

7）炼苗移栽：选择健壮的无菌苗，用多菌灵溶液浸泡清洗后，移栽到已消毒的蛭石+珍珠岩的基质中，先保湿培养一周，逐渐去掉盖子，继续生长即可。

2.根据权利要求1所述的沼泽小叶桦的离体芽快繁方法，其特征在于：步骤1）中，在新生芽萌动前，用50%的多菌灵可湿性粉剂喷洒植株，一周两次，直到植株吐芽、取材为止。

3.根据权利要求1所述的沼泽小叶桦的离体芽快繁方法，其特征在于：步骤2）中，先用70%酒精处理20s，再配合0.1%升汞处理10 min，后用无菌水冲洗4-5次。

4.根据权利要求1所述的沼泽小叶桦的离体芽快繁方法，其特征在于：步骤3）中，初代培养基成分为：MS +0.8~1.0 mg/L 6-BA +1.0 g/L PVP。

5.根据权利要求1所述的沼泽小叶桦的离体芽快繁方法，其特征在于：步骤4）中，增殖培养基成分为：MS + 0.6 mg/L 6-BA + 0.02 mg/L NAA，或MS + 0.4 mg/L 6-BA + 0.02 mg/L NAA。

6.根据权利要求1所述的沼泽小叶桦的离体芽快繁方法，其特征在于：步骤5）中，生根培养基成分：MS或1/2MS + 0.1或0.5 mg/L NAA。