[发明专利]载多金属氧酸盐抗癌纳米制剂的制备

权利要求书

1.一种载多金属氧酸盐抗癌纳米制剂，其特征在于利用生物材料对多金属氧酸盐进行包裹，制得纳米载体，再用靶向分子叶酸对纳米载体表面进行修饰；所用的生物材料为具有生物相容性的PLA-PEG₂₀₀₀及TPGS-COOH，所用多金属氧酸盐为[Eu(H₂O)₃(P₂W₁₇O₆₁)]₂。

2.根据权利要求1所述的载多金属氧酸盐抗癌纳米制剂，其特征在于所述采用的技术方案是利用具有生物相容性的材料，采用单乳超声法对多金属氧酸盐进行包裹，最终制备出具有体内长循环、疗效高、毒副作用小、稳定性好等功能的新型纳米制剂。

3.一种如权利要求1所述的载多金属氧酸盐抗癌纳米制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤1、生物材料TPGS-COOH的制备：

1)分别称取TPGS 757mg、DCC 103mg、戊二酸66mg，备用；

2)将步骤1)称取的药品混合溶于10mL二甲基亚砜中，室温下反应24小时；

3)步骤2)的反应过程会产生N，N-二环己基脲，通过过滤去除该副产物，将滤液转移进入透析袋，以二甲基亚砜为透析液，透析24小时去除未反应的DCC，冷冻干燥，得到TPGS-COOH；

步骤2、载多金属氧酸盐纳米载体的制备：

1)配制60mL含有0.5％聚乙烯醇水溶液，作为乳化剂，备用；

2)分别称取多金属氧酸盐25mg，PLA-PEG₂₀₀₀50mg及步骤1所得TPGS-COOH 80mg混合溶于4mL的三氯甲烷中，备用；

3)轻柔搅拌下将步骤2)所得溶液缓慢倒入步骤1)的60mL含有0.5％聚乙烯醇水溶液中；

4)利用超声波细胞粉碎机将步骤3)的混合溶液在25W条件下超声120s得到乳液，将该乳液在室温下搅拌过夜蒸发有机溶剂三氯甲烷，得到纳米粒子悬浮液；

5)将步骤4)得到的纳米粒子悬浮液在离心机上以10500rpm离心15min后得到纳米粒子；

6)用蒸馏水洗涤步骤5)得到的纳米粒子，并超声再次打碎，如此反复三次后可得到产物，并将其分散于水中，冻干两天得到纳米粉体；

步骤3、用叶酸对载多金属氧酸盐纳米载体表面进行修饰：

a、氨基化叶酸的制备：

1)分别称取叶酸441.4mg、NHS 230mg、DCC103mg，备用；

2)将步骤1)称取的药品混合溶于30mL二甲基亚砜中，50℃下反应6小时；

3)步骤2)的反应过程中会产生副产物N，N-二环己基脲，通过过滤去除该副产物；

4)在步骤3)所得的滤液中加入过量的乙二胺，以吡啶为催化剂，过夜反应；

5)在步骤4)反应完全的混合溶液中加入大量的乙腈将氨基化叶酸沉淀出来，离心收集，真空过滤后，得氨基化叶酸，即FOL-NH₂，放入真空干燥箱中烘干；

b、用氨基化叶酸对载多金属氧酸盐纳米载体表面进行修饰：

1)称取步骤2所得的纳米粒子10mg分散于5mL蒸馏水中，超声30分钟；

2)在步骤1)所得溶液中以摩尔比为TPGS-COOH/EDC/NHS＝1∶20∶6.7加入NHS和EDC，室温下反应2小时，激活纳米粒子表面的羧基端；

3)在步骤2)所得混合溶液中以摩尔比为TPGS-COOH/FOL-NH₂＝1∶10加入FOL-NH₂；

4)在步骤3)所得混合溶液中加三乙胺调节pH值至8，37℃下反应4个小时后进行离心；

5)用二甲基亚砜洗涤步骤4)离心得到的混合物，以去除未反应的FOL-NH₂，然后再用去离子水洗涤，冷冻干燥，得到表面经叶酸修饰的载多金属氧酸盐纳米制剂。