[发明专利]分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系及其应用

说明书

本发明公开了分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明首先公开了一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系，其微生物保藏编号为CGMCC No.13841。本发明进一步公开了所述杂交瘤细胞系分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10。间接免疫荧光检测显示，单克隆抗体10B10为一株血清型共享性单抗，其与O、A和Asia1型口蹄疫病毒均呈特异性反应。以本发明所述单克隆抗体10B10作为检测抗体，能够用于A、O和Asia1型口蹄疫病毒抗原或抗体的特异性检测。本发明所述口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10及其杂交瘤细胞系在口蹄疫的诊断或防治中具有应用前景。

技术领域

本发明涉及分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系，还涉及所述杂交瘤细胞系及其分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10在口蹄疫诊断或防治中的应用，属于口蹄疫的防治领域。

背景技术

口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus,FMDV)属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属的成员，其基因组为单股正链RNA，基因组RNA全长约8.5kb。口蹄疫(foot-and-mouthdisease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的，严重危害牛、猪、羊等多种偶蹄动物的高度接触性传染病，能够引起幼畜死亡、产奶量下降、肉食减少、肉品下降、动物的生产性能降低等，而且该病具有极强的传染性，可形成大范围流行，造成巨大的经济损失。预防和控制口蹄疫的关键是高效疫苗和准确的诊断方法的应用。

口蹄疫病毒有七个血清型，分别为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asial，各血清型之间无交叉免疫保护。目前，中国主要流行O型、A型和Asial型FMD。口蹄疫病毒的抗原结构十分复杂，不同血清型、基因型和分离株的抗原位点和抗原表位都不尽相同，存在广泛的抗原变异。因此，开发新的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体，将对于口蹄疫的有效防控具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是提供一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系以及其分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10；

本发明所要解决的第二个技术问题是将上述分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系及其分泌的单克隆抗体10B10应用于口蹄疫的诊断或防治。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

本发明首先公开了一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系。

本发明用灭活并纯化的A型口蹄疫毒株A/JLYS/CHA/2014免疫BALB/c鼠，将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞。抗体阳性杂交瘤细胞经3次有限稀释法亚克隆，获得三株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞，分别命名为10B10、3C7和4G2。间接免疫荧光检测结果显示，单抗10B10与A、O、Asia1型毒株均呈阳性反应，表明10B10为FMDV血清型共享性单抗；而单抗3C7和4G2仅与O型毒株均呈阳性反应，为O型毒株特异性单抗。

本发明将分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系10B10提交专利认可的机构进行保藏，其微生物保藏编号为：CGMCCNo.13841；分类命名为：分泌FMDV共享型单克隆抗体的杂交瘤细胞株。保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏时间是2017年4月24日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。