[发明专利]一种基于人间充质干细胞分泌活性因子的面霜及其制备方法

权利要求书

1.一种基于人间充质干细胞分泌活性因子的面霜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)人间充质干细胞培养：从细胞库中选取P2-P6的人间充质干细胞复苏，接种批次记为第一批次、第二批次、第三批次，接种密度分别为最大融合度的50％-60％、35％-45％、20％-30％；细胞接种完成，放于二氧化碳培养箱培养，温度37℃，二氧化碳体积比浓度5％；

(2)第一批次细胞融合度达到70％-80％时，以生理盐水清洗细胞2次，用复方电解质注射液进行饥饿培养；

(3)饥饿培养12-24小时后，第一批次细胞融合度达90％-95％，收取细胞培养上清，3000-4500g条件下离心5-8min除去沉淀，取离心后上清备用；

(4)取培养的第二批次细胞，当细胞融合度达到70％-80％，以生理盐水清洗第二批次细胞2次，用步骤(3)中细胞培养上清进行饥饿培养；

(5)饥饿培养12-24小时后，第二批次细胞融合度达90％-95％，收取细胞培养上清，3000-4500g条件下离心5-8min除去沉淀，取离心后上清备用；

(6)取培养的第三批次细胞，当细胞融合度达到70％-80％，以生理盐水清洗第三批次细胞2次，用步骤(5)中细胞培养上清进行饥饿培养；

(7)饥饿培养12-24小时后，第三批次细胞融合度达90％-95％，收取细胞培养上清，3000-4500g条件下离心5-8min除去沉淀，取离心后上清，得到高浓度间充质干细胞活性因子提取物；

(8)干细胞活性因子提取物与面霜基础配方按照比例进行配比，提取物：面霜基础配方按照质量比1:5到1:100。

所述面霜基础配方如下，百分比为质量百分比：

2.根据权利要求1所述基于人间充质干细胞分泌活性因子的面霜的制备方法，其特征在于，所述人间充质干细胞包括人脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、月经血间充质干细胞或牙髓间充质干细胞。

3.如权利要求1或2所述的制备方法制得的基于人间充质干细胞分泌活性因子的面霜。