[发明专利]一株高产酯化酶不产桔霉素的红曲菌及其应用在审
申请号: | 201710350213.0 | 申请日: | 2017-05-12 |
公开(公告)号: | CN107058133A | 公开(公告)日: | 2017-08-18 |
发明(设计)人: | 陈福生;郑朝依 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/02;C12Q1/04;C12Q1/44;C12N9/16;C12N9/20;C12G3/02;C12R1/645 |
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地址: | 430070 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高产 酯化 酶不产桔 霉素 曲菌 及其 应用 | ||
1.一株高产酯化酶且不产桔霉素的丛毛红曲菌(Monascus pilosus)M76113,其特征在于,保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC M 2017253。
2.权利要求1所述丛毛红曲菌M76113的筛选方法,其特征在于:
(1)菌株的获得:称取0.5g左右的山西老陈醋大曲,用药匙将其堆在改良PDA培养基(PDA培养基中加6%的乙醇,待平板凝固后,平板中间加40μL 10%的乳酸,使其在平板中间分散开来),待乳酸充分渗入大曲中后倒扣,30℃培养,待其菌丝长出,每天将其大曲上的杂菌刮除,直至长出红曲菌,通过反复划线分离,将其接于斜面保藏;
(2)菌株的鉴定:菌株接种于CYA、PDA、G25N和MEA培养基上,25℃,培养7d,观察其形态;
(3)酯化酶活力的测定:将所有菌株制成发酵样品,称取5g,以乙醇和己酸为底物,反应100h后用GC-MS分析其中的己酸乙酯的含量,以筛选出权利要求1所述的高产酯化酶的丛毛红曲菌M76113;
(4)桔霉素检测:采用国标GB/T 5009.222-2008提取桔霉素,使用UPLC检测桔霉素含量。
3.权利要求1所述的丛毛红曲菌M76113在食品生产中的应用。
4.一种酯化红曲麸皮的方法,其特征在于,权利要求1所述丛毛红曲菌M76113的发酵产物,通过将丛毛红曲菌M76113的种子液接种到麸皮中,并经培养通过干燥得到酯化红曲麸皮。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于:丛毛红曲菌M76113做为发酵菌株,接种量10%,装样量30g,于30℃,培养9d,所述固体发酵培养基组分为,麸皮∶水1∶1(质量比),水为双蒸水。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于:所述发酵为权利要求1所述丛毛红曲菌M76113的种子液接种至权利要求5所述发酵培养基中培养,接种量为10%(v/m);所述种子液为权利要求1所述丛毛红曲菌M76113的斜面洗得的孢子液,稀释至106,接种10%(v/v)于装有100mL种子培养基的250mL三角瓶中,30℃,170r/min培养24h;所述种子液培养基为:200g土豆去皮后切成小块,加水煮沸20min,过滤后,以蒸馏水定容至1 000mL,葡萄糖20g/L。
7.由权利要求4-7中所述方法制备的红曲麸皮通过40℃,恒温干燥24小时得到酯化红曲麸皮。
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