[发明专利]一种基于光声成像技术的活细菌检测方法

权利要求书

1.一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将光声成像增强剂加入活细菌的培养液中进行孵育，保证细菌活力并促进细菌对探针的吞噬，得细菌溶液；所述光声成像增强剂选自吲哚菁绿、普鲁士蓝中的一种；

2)将所得细菌溶液取150μL，加入体积为200μL的新EP管中，进行基于光声成像技术的活细菌检测方法。

2.如权利要求1所述一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述吲哚菁绿的浓度为0.4mg/mL，吸收峰为790nm波长。

3.如权利要求1所述一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述普鲁士蓝的浓度为0.4mg/mL，吸收峰为713nm波长。

4.如权利要求1所述一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述吞噬的温度为37℃，吞噬的转速为200rpm，吞噬的时间为8～12h。

5.一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将两种不同的光声成像增强剂吲哚菁绿和普鲁士蓝分别加入益生菌和致病菌的培养液中进行孵育，保证细菌活力并促进细菌对探针的吞噬，益生菌为乳杆菌、酪酸梭菌、双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、放线菌、酵母菌中的一种；致病菌为大肠埃希菌、沙门氏菌、志贺氏菌、变形杆菌、脆弱拟杆菌、耶尔森菌中的一种；

2)将所得益生菌细菌溶液和致病菌细菌溶液各取75μL混合，加入体积为200μL的新EP管中，进行基于光声成像技术的活细菌检测方法，根据所得光声强度值，计算出益生菌与致病菌的相对浓度比例。

6.如权利要求5所述一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于所述普鲁士蓝的浓度为0.4mg/mL，吸收峰为713nm波长，在光声成像仪器波长为680～980nm，所述光声成像仪采用美国Endra Nexus 128光声成像系统。

7.如权利要求5所述一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述吞噬的温度为37℃，吞噬的转速为200rpm，吞噬的时间为8～12h。

8.如权利要求5所述一种基于光声成像技术的活细菌检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述计算出益生菌与致病菌的相对浓度比例的计算公式如下：

其中，E为致病菌在不同波长处的光声信号值；F为益生菌在不同波长处的光声信号值；G为大肠埃希菌与乳杆菌的混合菌液分别在800nm和720nm不同波长处的光声信号值，分别指示吲哚菁绿和普鲁士蓝所标记的活细菌；C为不同细菌的浓度。