[发明专利]一种亲水性多肽纯化的方法在审
| 申请号： | 201710351738.6 | 申请日： | 2017-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN107163102A | 公开（公告）日： | 2017-09-15 |
| 发明（设计）人： | 徐红岩;秦敬国 | 申请（专利权）人： | 吉尔生化（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/20 | 分类号： | C07K1/20;C07K1/16 |
| 代理公司： | 上海浦东良风专利代理有限责任公司31113 | 代理人： | 张劲风 |
| 地址： | 201203 上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 亲水性 多肽 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种亲水性多肽纯化的方法，其特征在于包括以下步骤：
第一次凝胶色谱纯化步骤：
（1）将多肽样品加纯入水中超声搅拌溶解直至澄清，用微孔滤膜过滤；
（2）将多肽样品加入到预装好的凝胶柱中，上样量为1-5倍柱床体积；
（3）加入无盐水作为洗脱液，设置合适的流速洗脱分离样品；
（4）样品纯度大于90%的收集在一起放置；
第二次氨基柱纯化步骤：
（1）将上述收集的样品上样至反相色谱系统，洗脱流动相A相为磷酸缓冲液，流动相B相为乙腈；
（2）设置洗脱梯度、流速及检测波长；
（3）收集目标馏分；
（4）将收集馏分冻干称重。
2.根据权利要求1所述一种亲水性多肽纯化的方法，其特征在于所述磷酸缓冲液配制：取磷酸二氢钾13.61g，加入500mL溶解后加入氨水5.0mL，加水稀释至1000mL，混匀，用磷酸调pH至4.2±0.02。
3.根据权利要求1所述一种亲水性多肽纯化的方法，其特征在于所用凝胶为交联葡聚糖。
4.根据权利要求1所述亲水性多肽纯化的方法，其特征在于所用氨基柱为LUNA氨基柱。
5.根据权利要求1所述一种亲水性多肽纯化的方法，其特征在于所述多肽序列中亲水氨基酸占比超过50%。
6.根据权利要求1所述一种亲水性多肽纯化的方法，其特征在于所述多肽分子量不大于600Da。
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