[发明专利]一种检测尿外泌体荷载miRNAs的试剂盒和方法

权利要求书

1.一种检测尿外泌体荷载miRNAs的试剂盒，其特征在于：它包括外泌体提取试剂和miRNAs检测试剂，其中，提取试剂为聚乙二醇和氯化钠的混合溶液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述聚乙二醇和氯化钠的混合溶液中，聚乙二醇的浓度为0.16～0.24g/ml，所述氯化钠的浓度为0.0584g/ml。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述聚乙二醇和氯化钠的混合溶液中，聚乙二醇的浓度为0.16g/ml。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述miRNAs检测试剂为qPCR检测试剂，优选地，所述qPCR检测试剂为基于茎环法的M-MLV Frist Strand cDNA Synthesis Kit(OMEGA)和Green PCR Master Mix(Applied biosystems)试剂盒。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的试剂盒，其特征在于：它还包括RNA提取试剂，优选地，所述RNA提取试剂为Trizol试剂。

6.一种检测尿外泌体荷载miRNAs的方法，其特征在于：步骤如下：

(1)取尿液，采用权利要求1～4任意一项所述试剂盒中的提取试剂提取尿外泌体；

(2)提取尿外泌体中的总RNA，采用权利要求1～5任意一项所述试剂盒中的检测试剂检测，即可。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述提取的方法如下：

1)取待检样品，离心，取上清；

2)将提取试剂加入步骤1)的上清中，混匀，反应12h以上，离心，弃上清，收集沉淀，即可。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤1)中，所述离心是在4℃、2000g条件下离心10分钟。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤2)中，反应的温度是4℃；离心是在4℃、3580g条件下离心1h。

10.权利要求1～5任意一项所述试剂盒在制备肾纤维化检测试剂中的用途。