[发明专利]一种食品中游离氨基酸含量的测定方法

说明书

本发明涉及氨基酸检测领域，具体而言，涉及一种食品中游离氨基酸含量的测定方法包括以下步骤：对质量为m的待检测物预处理，得到体积为V的检测液；将检测液进行柱前衍生化，得到衍生化的检测液；采用超临界流体色谱仪采用特定参数下检测其中氨基酸的含量，得到检测液所含的氨基酸的质量浓度；通过以下公式分别计算得到所述待检测物中氨基酸的含量：(质量浓度*V)/m。该方法整个超临界流体色谱的检测过程不会超过16min，溶剂用量极少，并且谱图显示完全可以将十七种氨基酸同时分离开，并定量检测出含量，具有检测速度快、有机溶剂用量少、分离度高、灵敏度高、再现性好等优点。

技术领域

本发明涉及氨基酸检测领域，具体而言，涉及一种食品中游离氨基酸含量的测定方法。

背景技术

氨基酸是既含氨基(-NH₂)又含羧基(-COOH)的有机化合物的统称，是构成生物体蛋白质的基本单位，也是人体必需的营养物质之一，不仅具有营养保健价值，还具有特殊的生理调节功效，被认为是世界保健食品第三代产品。在食品工业中，氨基酸除用于食品营养强化剂外，还广泛用于调味、增香、消除异臭、防腐保鲜等方面，是食品品质鉴定中一个重要的理化指标。各种食品中都含有游离氨基酸，在食物的加工过程中，可以与肽、核苷酸、有机酸、糖、无机离子等形成相应的呈味活性物质，决定了每一种食物独有的风味特征。

目前，食品或饮料中游离氨基酸含量测定方法主要采用电位滴定法、茚三酮比色法、消旋光法、氨基酸分析仪法、色谱法(液相、气相)等。其中，反相高效液相色谱法准确度最高，应用最广，但该方法最主要的缺点是分析时间长、分离度差、有机溶剂用量大。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种超临界流体色谱法测定食品中游离氨基酸含量的方法，所述的测定方法能在16min内快速分离并分别定量检测出食品中十七种氨基酸的含量，具有检测速度快、有机溶剂用量少、分离度高、灵敏度高、再现性好等优点。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种食品中游离氨基酸含量的测定方法，包括以下步骤：

对质量为m的待检测物预处理，得到体积为V的检测液；

将所述检测液进行柱前衍生化，得到衍生化的检测液；

采用超临界流体色谱仪检测所述衍生化的检测液中氨基酸的含量，得到检测液所含的氨基酸的质量浓度；

所述超临界流体色谱仪的检测条件为：色谱柱的直径为3.0mm、柱长为100mm、填料粒径为1.7μm，填料为高密度二醇；流动相为超临界二氧化碳和含有甲酸铵的甲醇乙腈溶液，其中，甲醇与乙腈的体积比为1：0.9-1.1，甲酸铵在所述甲醇乙腈溶液中的质量百分数为0.18％-0.22％；采用梯度洗脱，超临界二氧化碳在不同时间段的体积百分比为：0-0.2min为100％-95％，0.2-5.0min为90％-70％，5.0-10.5min为80％-60％，10.5-16.0min为90％-70％，16.0-17.0min为95％-100％；

分析时间：3.5-16.0min；柱温：40-60℃；备压：1500-3000psi；进样量：0.2-10μl；流速：1.0-3.0mL/min；检测波长为280nm；

通过以下公式分别计算得到所述待检测物中氨基酸的含量：(质量浓度*V)/m。

本发明提供的测定方法，先将食品中的氨基酸提取出来，然后在超临界流体色谱仪中采用特定的洗脱条件，将十七种氨基酸分别选择性地分配，进而分离开，并定量检测出其浓度。最后代入公式(质量浓度*V)/m，计算出食品中十七种氨基酸的含量。整个超临界流体色谱的检测过程不会超过16min，溶剂用量极少，并且谱图显示完全可以将十七种氨基酸同时分离开，并定量检测出含量，具有检测速度快、有机溶剂用量少、分离度高、灵敏度高、再现性好等优点。