[发明专利]一种新的CTLA-4单克隆抗体

说明书

本发明提供了CTLA‑4的单克隆抗体，特别是高亲和力的CTLA‑4人源化单克隆抗体。本发明还提供与人、食蟹猴和小鼠的CTLA‑4交叉反应的功能性单克隆抗体。本发明进一步提供了本发明的抗体的氨基酸序列、克隆或表达载体、宿主细胞和用于表达或分离抗体的方法、鉴定抗体的表位。还提供包含本发明抗体的治疗组合物。本发明还提供了用抗CTLA‑4抗体治疗癌症和其它疾病的方法。

技术领域

本发明主要涉及抗CTLA-4抗体及其组合物，以及使用抗CTLA-4抗体对癌症、感染或其他人类疾病的免疫治疗。

背景技术

癌症免疫治疗已成为治疗癌症的热点研究领域。细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)是免疫检查点的验证靶点之一。在T细胞活化后，CTLA-4通常在抗原与TCR接合的1小时内，在T细胞上快速表达。CTLA-4可以通过与CD28竞争来抑制T细胞信号传导。CD28介导其中一个表征良好的T细胞共刺激信号：CD28与抗原呈递细胞上的配体CD80(B7-1)和CD86(B7-2)结合导致T细胞增殖，诱导产生白细胞介素-2和抗凋亡因子。由于CTLA-4对CD80和CD86的亲和力高于CD28，因此CTLA-4可以与CD80和CD86上的CD28竞争结合，导致T细胞活化的抑制。除了在活化的T细胞上的诱导表达外，CTLA-4在调节性T细胞(Treg)的表面上持续性表达，这表明CTLA-4可能是接触介导的抑制所必需的，并且与免疫抑制细胞因子诸如转化生长因子β和白细胞介素-10的Treg产生相关。

在许多临床前和临床研究中证明CTLA-4阻断可以诱导肿瘤消退。两种针对CTLA-4的抗体正在临床开发中。Ipilimumab(MDX-010，BMS-734016)是IgG1-κ型的全人抗CTLA-4单克隆抗体，是已被批准用于治疗晚期黑色素瘤的单一疗法的免疫调节剂。所提出的Ipilimumab的作用机制是干扰在激活的T细胞亚群上表达的CTLA-4与在专业抗原呈递细胞上的CD80/CD86分子之间的相互作用。由于CTLA-4和CD80/CD86间相互作用而促进的T细胞活化抑制性调节被阻断，这导致T细胞功能增强。由此产生的T细胞活化、增殖和淋巴细胞浸润到肿瘤中，导致肿瘤细胞死亡。商业剂型为5mg/mL用于输液的浓缩液。Ipilimumab也用于其他肿瘤类型的临床研究中，包括前列腺癌和肺癌。另一种抗CTLA-4抗体Tremelimumab做为治疗黑素瘤和恶性间皮瘤中的疗法也在研究之中。

发明内容

本发明提供了分离的抗体，特别是单克隆抗体或人源化的单克隆抗体。

一方面，本发明提供了一种抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段结合于人、猴、小鼠CTLA-4。

如上所述的抗体或抗原结合片段抑制CTLA-4结合于CD80或CD86。

在如上所述的抗体或抗原结合片段中，所述抗体或抗原结合片段的结合抗原表位包括CTLA-4的N145或N145的糖基化修饰。

一方面，本发明提供了一种抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或所述抗原结合片段结合于人、猴CTLA-4，其中所述抗体或抗原结合片段的结合抗原表位包括CTLA-4的P138。

一方面，本发明提供了一种抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段

a)结合于人CTLA-4，K_D of 4.77E-10M以下；并且

b)结合于小鼠CTLA-4，K_D of 1.39E-09M以下。

如前所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段具有下列性质中的至少一种：

a)结合于人CTLA-4，K_D为4.77E-10M至2.08E-10M，并且结合于小鼠CTLA-4，K_D为1.39E-09M至9.06E-10；