[发明专利]一种制备富含乳蛋白活性肽和磷脂酰丝氨酸的营养组合物的方法

说明书

本发明涉及一种采用微通道反应器制备富含乳蛋白活性肽和磷脂酰丝氨酸的营养组合物的方法，经过下列步骤：步骤一，将富含MFGM的乳清蛋白反应液和蛋白酶溶液泵入微通道反应器，制备得到乳蛋白活性肽体系；步骤二，高温钝化蛋白酶活性；步骤三，将包含了磷脂酶D溶液的丝氨酸溶液泵入微通道反应器，与步骤二制备得到的反应体系充分混合，得到混合反应体系；步骤四，进行磷脂酶D催化反应；步骤五，高温钝化磷脂酶D活性，终止酶解反应；步骤六，迅速降温至工艺要求的温度，得到产品。本发明具有反应速度快、产量高、产品品质好的优点。

技术领域

本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种在微通道反应器中制备富含乳蛋白活性肽和磷脂酰丝氨酸的营养组合物的方法。

背景技术

生物活性肽是指来源于动植物和微生物体的、具有生物活性作用的肽链片段。牛乳是生物活性肽的主要来源。牛乳中所含的生物活性肽分为游离生物活性肽和待酶解生物活性肽。牛乳中游离活性肽包括胰岛素及胰岛素样生长因子、转化生长因子、表皮生长因子和游离神经生长因子等。牛乳中待酶解的活性肽主要包括酪蛋白磷酸肽、类吗啡肽、抗高血压肽、免疫调节肽、抗血栓肽、抗菌肽等多种生物活性肽。乳蛋白活性肽具有多种生理活性功能，已经成为食品工业重要的研究开发热点。

乳脂肪球膜(Milk fat globule membrane,MFGM)是指在哺乳动物乳中包围脂肪球的膜或膜相关物质。乳脂肪球膜含有特定的糖蛋白如乳铁蛋白、黏蛋白、乳粘素和黄嘌呤氧化酶以及复合脂质如甘油磷脂和鞘脂等。在哺乳动物乳中，脂肪约占40g/L，主要由甘三脂(总脂肪的96％，W/W)、甘二酯(总脂肪的3％，W/W)和复合脂质(总脂肪的1％，W/W)组成。

磷脂酰丝氨酸是一类普遍存在的磷脂，通常位于细胞膜的内层，与一系列的膜功能有关。磷脂酰丝氨酸能增加脑突刺数目、脑细胞膜的流动性及促进脑细胞葡萄糖代谢，因而使脑细胞更活跃，如今已被越来越多地应用于医药及保健领域。

富含MFGM的各种成分可以商业化获得。MFGM可存在于奶油、酪乳和全脂乳中。例如Lacprodan MFGM-10，它是Arla Food Ingredient amba(丹麦)生产的富含MGFM的乳清蛋白组分。由于富含乳脂肪球膜MFGM产品常常含有丰富的蛋白和磷脂(含有大约50％蛋白和约12％的磷脂，包括约3％左右的磷脂酰胆碱和约2.7％的鞘磷脂，W/W)，因此可以此作为基础原料，运用酶法工艺，将其开发成为富含乳蛋白活性肽和磷脂酰丝氨酸的营养组合物，并且，将该营养组合物应用在食品、营养保健和化妆品等领域。

目前制备乳蛋白活性肽的方法主要分为以下两种：

1，化学水解法：将乳蛋白与一定浓度的酸或碱溶液混合，在密闭容器中，在一定温度和压力下，断裂肽链，然后分离纯化水解产物。但本法需要使用大量的酸碱，且制备得到的活性肽产物有异味，因此化学水解法逐步被生物法所取代。

2，生物法：使用蛋白酶或者直接使用微生物(含复合蛋白酶)，在一定温度条件下水解蛋白质，得到生物活性肽，具有操作条件温和，不使用有毒化学试剂，产品品质好等诸多优点，已经成为目前生物活性肽制备的主要方法。

现有技术中，有关磷脂酰丝氨酸的制备方法有多种，其中以提取法和酶转化法为主。提取法是从动物磷脂中提取磷脂酰丝氨酸，主要以动物的大脑为原料。专利CN1583766A就是以动物脑为原料提取磷脂酰丝氨酸。但由于疯牛病等原因，其产品安全性遭到怀疑，现已被淘汰。近年来酶催化技术被广泛应用于磷脂酰丝氨酸的制备中，例如专利CN101230365A，就是用大豆卵磷脂为原料酶法制备磷脂酰丝氨酸，专利CN100402656C是以提取自鱼肝中的磷脂为原料，专利CN101157946A以提取自鱿鱼中的磷脂为原料，采用磷脂酶D酶法催化鱼肝中的磷脂酰胆碱或鱿鱼中的磷脂酰胆碱与丝氨酸反应制备富含多不饱和双键脂肪酰基的磷脂酰丝氨酸。