[发明专利]高羊茅茎秆中内生真菌检测方法在审

申请号：	201710362396.8	申请日：	2017-05-22
公开（公告）号：	CN108931411A	公开（公告）日：	2018-12-04
发明（设计）人：	邵万均	申请（专利权）人：	邵万均
主分类号：	G01N1/30	分类号：	G01N1/30
代理公司：	暂无信息	代理人：	暂无信息
地址：	210000 江苏省南京市***	国省代码：	江苏;32
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摘要：
搜索关键词：	茎秆茎髓高羊茅内生真菌镊子检测玻璃板消毒表面消毒检测结果酒精溶液染色操作染色效率纵向切开植株盖玻片染色剂小刀表皮刮取小段去除擦拭挤压外部观察
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【说明书】：

本发明公开了一种高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，将高羊茅植株剪成5至8厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；对茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；使用消毒后的镊子和小刀将茎秆纵向切开，裸露出茎髓；用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上；向茎髓物质滴上染色剂，染色操作45至60秒；将盖玻片放置在茎髓物质上，挤压4至5次，将茎髓物质均匀铺开；对高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。相比现有技术，本发明具有染色效率高，观察方便，成本低的特点。

技术领域

本发明涉及真菌检测领域，尤其涉及一种高羊茅茎秆中内生真菌检测方法。

背景技术

高羊茅学名：Festuca elata Keng ex E.Alexeev，又名：羊茅，属禾本目，禾本科多年生地被植物。按功能用途分类：分草坪型(观赏)、牧草型(作为牧草饲养牲畜)。性喜寒冷潮湿、温暖的气候，在肥沃、潮湿、富含有机质、pH值为4.7-8.6的细壤土中生长良好。大量应用于运动场草坪和防护草坪。作为牧草饲养牲畜。

但是，目前的研究发现，许多高羊茅自主内含有内生真菌，会产生生物碱，对牛羊产生危害，所以，对牧草进行内生真菌检测具有重大意义。

发明内容

发明目的：针对现有技术的不足与缺陷，本发明提供一种染色效率高，观察方便，成本低的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法。

技术方案：本发明所述的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，包括下述步骤，

(1)将高羊茅植株剪成5至8厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；

(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；

(3)使用消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开，裸露出茎髓；

(4)用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上；

(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上染色剂，染色操作45至60秒；

(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上，挤压4至5次，将茎髓物质均匀铺开；

(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。

其中，所述的步骤(3)采用高温湿热法对镊子和小刀进行消毒。