[发明专利]扩增检测玉米opaque11基因用分子标记的特异性引物组及其应用

说明书

本发明涉及一种扩增检测玉米opaque11基因用分子标记的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该opaque11基因左侧DNA片段的一对特异性引物SSR946的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GTGCCTGATAAAGAAGCTGG；反向引物从5′端至3′端为：GAAAAAAATCGCTATGGCTAA；扩增该opaque10基因右侧DNA片段的一对特异性引物SSR456的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GCTAGGTCGTCGGAAGTT；反向引物从5′端至3′端为：ATGCCAGTATGAATGAGTGA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中opaque11基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用opaque11基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

技术领域

本发明涉及一种扩增检测玉米opaque11基因用分子标记的特异性引物组及其应用。

技术背景

玉米（Zea mays L.）是一年生草本植物，隶属于禾本科玉米属。原产于中美洲，是世界三大粮食作物之一。玉米的适应性很强，分布广，用途多，增产潜力大，在全世界播种面积和总产量仅次于水稻和小麦，居第三位。我国不仅是世界玉米的主要生产国，也是玉米的主要消费国。玉米的下游产业链长，涉及种植、养殖、食品、化工、医药等诸多行业。现今全世界约有三分之一人口以玉米作为主要食粮，其中亚洲人的食物组成中玉米占50%, 多者达90%以上 , 非洲占25%, 拉丁美洲占40%。玉米同时是家畜、家禽的上等精饲料，对提高猪肉、牛乳和蛋类产品的产量和品质有显著作用。玉米还是主要的工业原料，被广泛用于食品、医药、纺织等工业部门。我国对于玉米的消费量和需求一直在不断的增长中。因此，这对玉米产量和品质的改良与创新提出了更高的要求。

玉米籽粒的蛋白质含量约为8.6%左右，其中赖氨酸，蛋氨酸等氨基酸的含量较低。为了提高玉米品质和营养价值，国内外科研人员以玉米籽粒突变体为材料，借助于遗传学的研究手法对其进行改造，提高其营养价值。在玉米中，有一类与蛋白品质相关的突变体，被称为Opaque或Floury突变体。在表型上，这类突变体胚乳细胞内的主要储藏细胞器淀粉粒和蛋白体包装不紧密，造成籽粒胚乳结构疏松，比较容易粉碎，所以与野生型的透明籽粒相比容易消化，适口性好，更适合用于优质饲料的加工。生化方面，这类突变体能够显著提高玉米籽粒中赖氨酸等必需氨基酸的含量，进而提高玉米的营养价值。其中最为有名的是Opaque2（o2）突变体, 世界上许多国家利用opaque 2 基因 (o2) 进行玉米蛋白的研究和改良工作, 并取得了显著成绩。o2 基因的突变能够降低醇溶蛋白在胚乳蛋白中的比例、显著提高玉米籽粒胚乳蛋白中赖氨酸含量的隐性突变基因。