[发明专利]一种基于TALENs基因编辑花生育种方法在审
| 申请号： | 201710363687.9 | 申请日： | 2017-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN107217070A | 公开（公告）日： | 2017-09-29 |
| 发明（设计）人： | 温世杰;陈小平;李杏瑜;李少雄;梁炫强;洪彦彬 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙)44288 | 代理人： | 蔡碧慧,邓星文 |
| 地址： | 510640 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 talens 基因 编辑 花生 育种 方法 | ||
1.一种基于TALENs基因编辑花生育种方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)TALENs左右臂序列的设计：分析花生品种的fad2基因的序列，并设计左右臂序列；
2)组装至表达载体：将步骤1)得到的左右臂序列组装至植物表达载体并转染农杆菌，得到含有转化质粒的农杆菌；
3)遗传转化：将步骤2)得到的含有转化质粒的农杆菌遗传转化至花生种子；
4)选育：根据目标性状选育。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述左右臂序列中左臂序列为SEQ ID No.1，右臂序列为SEQ ID No.2。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述左右臂序列中左臂序列为SEQ ID No.3，右臂序列为SEQ ID No.4。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，所述表达载体为pCAMBIA3301或pCAMBIA1301。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中，遗传转化的具体操作为：
a)用花生种子制作外植体；
b)将含有转化质粒的农杆菌接种至YEP培养基培养，收集菌体，将菌体重悬于含有乙酰丁香酮的液体MS培养基中，得到侵染液；
c)将外植体浸浮于侵染液，共培养，得到共培养后外植体。
6.根据权利要求5的方法，其特征在于，步骤c)中，共培养前，向侵染液加入0.1wt％的silweet L-77。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中，所述目标性状为油酸含量大于60％。
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