[发明专利]一种抗菌脂肽皮脂膜修复组合物及其应用

权利要求书

1.一种皮脂膜修复组合物，其特征在于，药效成分如下，均为重量份：

羧甲基壳聚糖2～5份，几丁糖0.5～2份，聚丙烯酸钠1～2份，抗菌肽2～3份，脂肽类抗生素2～3份；

所述抗菌肽、抗脂肽类抗生素为将枯草芽孢杆菌发酵液经分离步骤后，通过提取抗菌肽、抗脂肽类抗生素获得；

所述为将枯草芽孢杆菌发酵液经分离步骤后，通过提取抗脂肽类抗生素步骤获得。

2.如权利要求1所述的皮脂膜修复组合物，其特征在于，药效成分如下，均为重量份：

羧甲基壳聚糖5份，几丁糖2份，聚丙烯酸钠1.5份，抗菌肽3份，脂肽类抗生素3份。

3.如权利1所述的皮脂膜修复组合物，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌发酵液采用如下方法制备：

(1)将枯草芽孢杆菌接种于液体培养基中进行活化培养至对数生长期，制得活化菌体；

所述液体培养基组分如下，均为重量百分比：

酵母膏0.5～1％，蛋白胨0.7～1％，氯化钠0.5～1.2％，余量水，pH7.0～7.2；

(2)将步骤(1)制得的活化菌体按体积百分比3～5％接种于液体发酵培养基中，在28～38℃下，发酵培养24～48小时，制得微生物发酵液；

所述液体发酵培养基组分如下，均为重量百分比：

酵母膏0.1～0.3％，蛋白胨0.7～1％，葡萄糖1～1.5％，L-谷氨酸0.1～0.5％，谷氨酸钠0.1～0.5％，L-苯丙氨酸0.1～0.5％，淀粉0.05～0.1％，糊精0.05～0.1％，磷酸二氢钾0.07～0.1％，硫酸镁0.01～0.05％，氯化钾0.01～0.05％，余量水，pH7.0～7.2。

4.如权利要求3所述的皮脂膜修复组合物，其特征在于，所述分离步骤如下：

(i)将微生物发酵液在4℃、8000r/min的条件下离心15～20min，取上清，调pH至2.0～2.5，4℃沉淀1h，然后10000r/min的条件下离心15～20min，取沉淀，用体积百分比浓度为70％的甲醇溶液溶解提取2～4次，调pH值至中性，经旋转蒸发仪除去甲醇后真空干燥，制得抗菌粗提物；

(ii)将步骤(i)制取的抗菌粗提物经甲醇溶解，0.45μM微孔滤膜过滤，上样于Sephadex LH-20柱，分段收集样品，通过TLC检测，获得含抗菌肽和脂肽类抗生素的馏分。

5.如权利要求4所述的皮脂膜修复组合物，其特征在于，所述步骤(i)中，pH调节剂为5.5～6.5mol/L的HCl。

6.如权利要求4所述的皮脂膜修复组合物，其特征在于，所述步骤(i)中，真空干燥条件为40℃真空干燥55～65min；

进一步优选的，所述步骤(i)中，所述甲醇溶液溶解提取时间为2小时，提取过程中磁力搅拌，提取后过滤去除沉淀。

7.如权利要求4所述的皮脂膜修复组合物，其特征在于，所述步骤(ii)中，含抗菌肽和脂肽类抗生素的馏分利用HPLC进行进一步纯化。

8.如权利要求1所述的皮脂膜修复组合物，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌为购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏编号为1.1413的枯草芽孢杆菌。

9.一种枯草芽孢杆菌抗菌脂肽皮脂膜修复贴，其特征在于，包括透气层、压敏胶层和保护层，压敏胶层设置于透气层与保护层之间，权利要求1所述皮脂膜修复组合物涂覆于压敏胶层的外表面。

10.权利要求9所述枯草芽孢杆菌抗菌脂肽皮脂膜修复贴的制备方法，其特征在于，步骤如下：

a、按重量份比例将羧甲基壳聚糖、几丁糖和聚丙烯酸钠混合均匀，然后加入抗菌肽和脂肽类抗生素，加入生理盐水溶液按重量份补足100份，制得皮脂膜修复组合物溶液；

b、将步骤a制得的皮脂膜修复组合物溶液涂敷于压敏胶层外表面，然后封装透气层和保护层，制得枯草芽孢杆菌抗菌脂肽皮脂膜修复贴。