[发明专利]CK19联合OV6在肝癌索拉菲尼精准治疗中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及CK19和OV6蛋白的联合应用，具体涉及CK19和OV6蛋白组合在指导肝癌索拉菲尼精准治疗中的应用。本发明中基于CK19和OV6蛋白检测的试剂盒可以用于判定肝前体细胞来源的肝癌(即CK19⁺OV6⁺的肝癌)，并可以用于指导临床医生对此类病人进行Sorafenib精准治疗。

背景技术

原发性肝细胞癌(简称肝癌)是全球常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率长期居高不下。目前肝癌的治疗仍以手术治疗为主，但肝癌发病复杂，部分病人确诊时已是中晚期，错过最佳手术时间；在我国，很多肝癌病人长期经历肝硬化病程，身体状况差，不能接受手术治疗；另外，大量肝癌病人经手术治疗后出现复发，二次手术难度大、风险高。对于这类病人，有效的药物治疗是控制病情、缓解症状和延长生存时间的最佳途径。然而，肝癌对常规化疗药物不敏感，加之很多患者身体状况不佳，难以承受化疗药物带来的毒副作用，进而导致肝癌患者较差的预后。近年来针对肿瘤细胞异常信号通路的分子靶向抗肿瘤药物，因其较高的治疗指数和较低的毒副作用备受关注。其中Sorafenib是迄今唯一被美国FDA批准用于肝癌治疗的分子靶向药物；然而，已有多项研究证实Sorafenib治疗肝癌病人的总体疗效不高，中位生存时间为3个月，部分患者未显示出治疗效果，甚至出现严重不良反应。因此，寻找特异性分子标志物指导Sorafenib在临床中的用药显得尤为重要。

相关研究表明，部分肝癌来源于肝前体细胞的恶性转化，肝前体细胞标志物CK19的表达与肝癌病人的不良预后相关；另外，有研究报道肝前体细胞表达某些特异性标志物，如OV6。我们通过对肝癌组织连续切片进行CK19和OV6的免疫组织化学染色分析，发现来源于肝前体细胞CK19⁺OV6⁺肝癌病人预后更差。Sorafenib能显著抑制恶性转化的肝前体细胞的自我更新，并诱导其凋亡。CK19⁺OV6⁺肝癌病人术后给予sorafenib治疗后，其复发及总体生存状况得到明显改善，提示肝前体细胞来源的CK19⁺OV6⁺肝癌更适用于Sorafenib的治疗。以上结果提示我们，CK19和OV6联用可以作为肝癌分子分型标志物并指导预后和个性化治疗。

目前CK19和OV6联合作为肝癌分子分型标志物并指导预后和个性化治疗未见文献报道。

发明内容

本发明目的是提供CK19和OV6蛋白的联合在制备肝癌分子分型试剂盒用于肝癌索拉菲尼个性化治疗的应用。

本发明前期统计发现，本发明人所在的中国人民解放军第二军医大学附属东方肝胆外科医院手术切除的HCC中胆系标志物CK19阳性比例约为9％。由于肝前体细胞表达肝细胞和胆管细胞的标志物，因此其可能是CK19⁺HCC的主要来源。OV6是公认且常用的肝前体细胞标志物，通过对CK19⁺HCC进行OV6免疫组织化学染色，我们发现其中约65％呈OV6阳性，说明这部分CK19⁺OV6⁺肝癌来源于肝前体细胞，提示CK19和OV6的联合应用可指导肝癌的分子分型。

进一步地，本发明经实验发现Sorafenib能够显著抑制恶性转化的肝前体细胞的自我更新能力，并促进细胞凋亡，提示Sorafenib可能用于肝前体细胞来源的CK19⁺OV6⁺肝癌的个性化治疗。

更进一步地，我们对CK19⁺OV6⁺肝癌患者的临床资料进行统计分析，筛选出给予Sorafenib治疗的CK19⁺OV6⁺病人和未给予Sorafenib治疗的CK19⁺OV6⁺病人，结果表明给予Sorafenib治疗的CK19⁺OV6⁺肝癌病人的复发及总体生存状况均好于未给予Sorafenib治疗的CK19⁺OV6⁺肝癌病人，进一步提示Sorafenib更适用于肝前体细胞来源的CK19⁺OV6⁺肝癌的个性化治疗。

因此，本发明认为，CK19和OV6的联合应用具备作为肝癌分子分型标志物的可能性，并可指导肝癌预后和个性化治疗。

本发明的第一方面，提供了CK19和OV6联用在制备肝癌分子分型标志物中的应用。