[发明专利]一种HE染色及调整方法在审
申请号: | 201710376288.6 | 申请日: | 2017-05-25 |
公开(公告)号: | CN107389416A | 公开(公告)日: | 2017-11-24 |
发明(设计)人: | 周红敏;彭兴旺;易达;商亚彤;张亮 | 申请(专利权)人: | 长沙金域医学检验所有限公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410000 湖南省长沙市高新开发区麓天路*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 he 染色 调整 方法 | ||
1.一种243241670HE染色及调整方法,其特征在于,包括:
步骤一:将切好的石蜡切片在60-70℃的烤箱中烘烤至少10分钟;
步骤二:将步骤一中得到的切片进行脱蜡;
步骤三:将步骤二中得到的切片使用苏木素染液染色5-8分钟后用水清洗1分钟,然后使用0.5-1%盐酸酒精分化片刻,在切片颜色由蓝变红后,使用饱和碳酸锂反蓝片刻,所述切片颜色由蓝变红,之后使用1%伊红酒精浸染50-100秒;
步骤四:将步骤三中得到的切片经过脱水操作,然后使用二甲苯I进行透明,时间为50-100秒;
步骤五:将步骤四中得到的切片取出后用中性树胶封固。
2.根据权利要求1所述的HE染色及调整方法,其特征在于,所述步骤一中的脱蜡包括:
步骤1:使用二甲苯IAR浸泡5-7分钟;
步骤2:使用二甲苯IIAR浸泡5-7分钟;
步骤3:使用100%酒精I浸泡50-100秒;
步骤4:使用100%酒精II浸泡50-100秒;
步骤5:使用95%酒精浸泡50-100秒;
步骤6:使用80%酒精浸泡50-100秒;
步骤7:用水清洗。
3.根据权利要求2所述的HE染色及调整方法,其特征在于,所述步骤四还包括使用二甲苯II再次透明,时间为50-100秒。
4.根据权利要求3所述的HE染色及调整方法,其特征在于,所述步骤三中,使用1%伊红酒精浸染之前使用温水或者95%酒精浸泡10-80秒。
5.根据权利要求4所述的HE染色及调整方法,其特征在于,所述步骤四中的脱水操作包括:
步骤a:使用95%酒精浸泡50-100秒;
步骤b:使用95%酒精浸泡50-100秒;
步骤c:使用100%酒精I浸泡50-100秒;
步骤d:使用100%酒精II浸泡50-100秒。
6.根据权利要求5所述的HE染色及调整方法,其特征在于,所述步骤五中使用的中性树胶,预先用二甲苯溶解。
7.根据权利要求6所述的HE染色及调整方法,其特征在于,还包括观察染色结果及染色问题,根据染色问题进行调整。
8.根据权利要求7所述的HE染色及调整方法,其特征在于,所述染色问题及对应的调整方法包括:
如染色切片发白,判定为二甲苯脱蜡时间不够,延长脱蜡时间或者更换二甲苯;
如染色切片发灰,判定为组织固定脱水不佳或者染液配置PH不符,应改进组织固定脱水程序或者改进染液配方;
如染色切片着色不均匀,判定为染液太少或者分布不均,应增加染液量或在染液中加入甘油等增强液体亲和力;
如染色切片染色偏蓝,判定为苏木素染色时间过久或者分化不足,应减少苏木素染色时间或者延长分化时间;
如染色切片染色偏红,判定为伊红染色时间过久或者染色不足,应改进苏木素染色时间或者减少伊红染色时间;
如核着色欠佳,判定为组织脱水不佳,应加强组织固定脱水,将切片用生物穿透剂进行处理以利于苏木素着色。
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