[发明专利]一种提高人睾丸精子检出的溶液有效
申请号: | 201710376347.X | 申请日: | 2017-05-25 |
公开(公告)号: | CN107034179B | 公开(公告)日: | 2020-06-09 |
发明(设计)人: | 岳焕勋;李福平 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西第二医院 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人: | 李蕊;何凡 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 睾丸 精子 检出 溶液 | ||
本发明公开了一种提高人睾丸精子检出的溶液,该溶液包括以下组分:氯化钠、氯化钾、硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钠、乳酸钠、碳酸氢钠、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸、2‑羰基丙酸钠、己酮可可碱和咖啡因,为了使溶液的生理环境与体细胞的生理环境类似,方便精子的存活,将溶液的pH值调节到7.2~7.4的范围内,同时为了随时监控溶液是否变质,溶液中还添加有酚红。采用上述溶液,能够明显提高睾丸中精子的运动能力,能轻易将精子与生精上皮细胞区分开来,能直接在显微镜下观察精子是否具有生命。
技术领域
本发明涉及一种精子检出液,具体涉及一种提高人睾丸精子检出的溶液。
背景技术
在治疗男性不育的过程中,由于精液中无精子或排出体外的精子质量不佳,通常会采用穿刺或切开睾丸获取精子,通过单精子卵胞浆内注射技术达到体外受精辅助生育的目的。正常生理状态下睾丸精子不具有自然运动能力,自睾丸中取出的不运动精子混杂于大量各种生精上皮细胞中,对于操作而言辨认难度较大,且不动精子无法直观地通过显微镜下观察来辨认其是否具有生命力。
发明内容
针对上述现状,本发明提供一种提高人睾丸精子检出的溶液,该溶液能有效解决睾丸精子不运动而难以辨别其是否具有生命力的问题。
为了达到上述目的,本发明所采用的技术方案是提供一种提高人睾丸精子检出的溶液,该溶液包括以下组分且其最终浓度为:氯化钠90~110mmol/L、氯化钾3.0~3.5mmol/L、硫酸镁0.3~0.8mmol/L、氯化钙1~5mmol/L、磷酸二氢钠0.01~0.1mmol/L、乳酸钠5~10mmol/L、碳酸氢钠30~35mmol/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸5~10mmol/L、丙酮酸钠0.1~0.5mmol/L、己酮可可碱5~10mmol/L、咖啡因1~5mmol/L,其余为超纯水。
进一步,该提高人睾丸精子检出的溶液包括以下组分且其最终浓度为:氯化钠100mmol/L、氯化钾3.2mmol/L、硫酸镁0.5mmol/L、氯化钙2.0mmol/L、磷酸二氢钠0.053mmol/L、乳酸钠10mmol/L、碳酸氢钠30.9mmol/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸10mmol/L、丙酮酸钠0.25mmol/L、己酮可可碱7.5mmol/L、咖啡因2.5mmol/L,其余为超纯水。
本发明的有益效果是:该溶液中的无机盐组分全面模拟了细胞外液的生理环境,为精子提供了良好的生存环境;溶液中添加丙酮酸钠,能够有效抑制caspase-3而改善细胞凋亡,并增加谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比率,提升细胞的抗氧化能力;溶液中的咖啡因不仅可以影响细胞中线粒体的能量代谢,而且还能够刺激精子获能及自发的顶体反应,从而提升精子的运动能力;溶液中添加的己酮可可碱能够有效激活并增加睾丸精子的活动能力,同时己酮可可碱还可以抑制环腺苷酸的分解,而细胞内cAMP在激活精子运动中扮演着中心角色。
在上述技术方案的基础上,本发明还可以做如下改进。
进一步,溶液还包括1%wt的酚红。
采用上述进一步技术方案的有益效果是:酚红是一种很好的pH指示剂,pH不同时,酚红颜色变化明显。本发明溶液正常pH在7.4左右,此时酚红呈粉红色到橙红色,当溶液颜色与此不符时,证明溶液已经变质酸化,不能继续用于实验,避免了溶液变质而带来的风险。
进一步,溶液的pH值为7.2~7.4。
采用上述进一步技术方案的有益效果是:配置溶液的pH值与人体细胞液的pH值处于同一范围,为离体的精子提供类似与人体的生存环境,更加有利于精子的运动。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。
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