[发明专利]阿魏菇多糖在制备犬透明带3DNA疫苗佐剂中的应用

说明书

本发明公开一种阿魏菇多糖在制备犬透明带3DNA疫苗佐剂中的应用，此应用中阿魏菇多糖的纯度范围为40%‑95%、阿魏菇多糖与犬卵透明带3DNA疫苗的质量比为1:1～10:1，可应用的免疫动物为犬类、小鼠、大鼠中的任意一种。本发明提供的用阿魏菇多糖作为犬透明带3DNA疫苗佐剂，在利用大鼠进行效果验证实验时，IgG抗体水平相比于单用pcDNA3‑CZP3组明显升高，总产仔数相比于单用pcDNA3‑CZP3组的41只阿魏菇多糖配伍之后下降至最低13只，展现出了良好的有效性，能够更好的提高抗原的免疫原性，增强免疫效果。

技术领域

本发明涉及药物用途的技术领域，具体地说，本发明涉及一种阿魏菇多糖在疫苗佐剂中的应用。

背景技术

由于流浪犬生育无法控制，致使许多大城市流浪犬数量激增，伤人、咬死家畜和传播疾病时有发生，过去控制流浪犬数量多是采用诱杀、棒打等不为人道的方法，这种捕杀方法方式较为残忍，极容易引起爱狗人士的不满以及社会舆论的压力。采用犬ZP3(Caninezona pellucida 3，CZP3)为靶抗原，研制犬ZP3DNA疫苗pcDNA3-CZP3，不仅具有一定的抗生育效果，也具有广泛的应用前景。但该疫苗存在抗原性不高，在使用过程中出现了免疫效果不佳，且疫苗抗原用量较高，不能达到对流浪犬的数量进行有效控制的目的。

佐剂是指加入疫苗制剂后能促进、增强或延长机体对抗原特异性免疫应答的物质。佐剂也是一种抗原辅助剂,与疫苗共同使用可以明显提高疫苗的免疫效果。佐剂被用来增强疫苗免疫作用已有80多年的历史。免疫佐剂可辅佐免疫原刺激机体产生较早、较强、持久的免疫应答,现有的免疫佐剂存在免疫增强效果不理想，免疫力不持久等问题。

阿魏菇，学名阿魏侧耳，是一类食药两用珍稀真菌，因专性寄生或腐生于药用植物阿魏的根茎上而得名。阿魏菇的子实体含有丰富的多糖、蛋白质、碳水化合物、多种维生素及矿物质等活性成分，具有较高的营养和药用价值。多糖是一类特殊的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、增强免疫力、抗辐射、降血脂等多种活性，被称为生物反应调节剂，是继核酸、蛋白质之后的另一种有待深入研究色生物大分子。阿魏菇多糖(Pleurotusferulaepolysaccharide,PFLP)是阿魏菇中的一种重要有效成分，能够增强T细胞功能，促进抗体形成，诱导干扰素产生，从而使机体的免疫系统得到激活。王金辉、黄健等人对阿魏菇多糖免疫活性进行研究，发现阿魏菇多糖能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，并且呈现明显的剂量依赖性。此外，之前的研究表明纯化的阿魏菇多糖可以有效的激活树突状细胞疫苗，但利用阿魏菇多糖作为佐剂联合犬透明带3DNA免疫不育疫苗佐剂影响疫苗的免疫效果未见有报道。

发明内容

为解决现有的犬透明带3DNA疫苗存在的抗原性不高，在使用过程中免疫效果不佳，且疫苗抗原用量较高，不能达到对流浪犬的数量进行有效控制的目的的问题，本发明提供阿魏菇多糖在制备犬透明带3DNA疫苗佐剂中的应用，能有效提高疫苗免疫效果，降低疫苗抗原用量。

本发明通过以下技术方案实现的:

阿魏菇多糖在制备犬透明带3DNA疫苗佐剂中的应用。

优选的，本发明中的阿魏菇多糖由新鲜阿魏菇或阿魏菇冻干粉中提取获得。

优选的，本发明中的阿魏菇多糖的纯度为96％。

优选的，本发明应用中的阿魏菇多糖与犬卵透明带3DNA疫苗的质量比为1:1～10:1。

更优选的，本发明应用中的阿魏菇多糖与犬卵透明带3DNA疫苗的质量比为2:1。

进一步，阿魏菇多糖在制备犬透明带3DNA疫苗佐剂中的应用，接种步骤为先注射阿魏菇多糖，后注射pcDNA3-CZP3DNA疫苗。

阿魏菇多糖在制备犬透明带3DNA疫苗佐剂中的应用，接种步骤为pcDNA3-CZP3DNA疫苗和阿魏菇多糖同时注射。