[发明专利]一种exosomes装载的miR-93-5p在治疗类风湿性关节炎中的应用

说明书

本发明提供了一种exosomes装载的miR‑93‑5p在治疗类风湿性关节炎中的应用，属于生物医学技术领域；本发明首先制备过表达或阻断miR‑93‑5p的G‑exosomes，并通过体外实验证明，过表达miR‑93‑5p的G‑exosomes更加明显的抑制了Th17细胞的分化；并通过研究过表达和阻断miR‑93‑5p的G‑exosomes对于CIA模型小鼠发病的作用，发现过表达miR‑93‑5p的G‑exosomes对CIA小鼠的保护作用更强了；而阻断miR‑93‑5p的G‑exosomes则没有上述作用；结果表明过表达miR‑93‑5p的G‑exosomes可用于类风湿性关节炎的治疗。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及一种exosomes装载的miR-93-5p在治疗类风湿性关节炎中的应用，具体涉及粒细胞样髓源性抑制细胞来源exosomes装载的miR-93-5p在治疗类风湿性关节炎中的应用。

背景技术

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种病因不明的慢性进行性并累及全身多系统的自身免疫性疾病，病理特征表现多为手、足小关节对称性的滑膜慢性炎症，其造成的身体危害，严重影响人类生产和生活。RA的确切发病机制不明，免疫学与流行病上的研究认为与遗传、激素、环境、病毒感染等因素有关。目前对其治疗的主要目的在于减轻关节的炎症，抑制疾病的发展，尽可能保护关节和降低疾病的活动度。临床上对于RA的治疗主要包括药物治疗和免疫学治疗。药物治疗主要包括非甾体类药物、抗风湿类药物、糖皮质激素等，但药物带来的毒副作用较多，影响肝肾代谢功能，容易产生药物依赖，此外激素类药物可导致患者胃肠不良反应、向心性肥胖、免疫力低下、骨质疏松等。免疫学治疗主要包括免疫净化和生物靶向药物治疗，其中免疫净化可以去除类风湿性关节炎患者血中自身抗体、免疫复合物和免疫球蛋白等，但治疗成本高、操作复杂，创伤较大。生物靶向药物主要包括TNF-α拮抗剂和针对RA炎症分子的生物制剂，这些药物具有快速抑制炎症反应，修复已损伤关节的作用，但价格十分昂贵，并且存在导致潜伏结核感染的患者结核病复燃，肝损伤，罹患肿瘤等风险。另外针对RA炎症分子的生物制剂包括IL-1受体拮抗剂和IL-6受体拮抗剂等。传统药物治疗带来极大的毒副作用，目前免疫学治疗方法相对单一且价格昂贵，对于RA的治疗仍然有很多需要研究和改进之处。

已有研究者发现一类新的CD4⁺辅助性T细胞，由此细胞亚群特异性分泌IL-17而被称为辅助T细胞17型(helper T cell type 17,Th17)，它还可以分泌IL-6、TNF-α等细胞因子，I L-17和Th17细胞在RA及其动物模型的发病中发挥重要作用。

近年来相关研究表明MDSCs在自身免疫性疾病的治疗方面有巨大的潜能，已有实验利用MDSCs治疗小鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis，CIA)，并取得一定疗效；但是，由于MDSCs来源不足、储存不便及成分复杂等缺点限制了其应用。髓源性抑制细胞 (myeloid derived suppressor cells,MDSC)是骨髓来源的异质性细胞群体，在小鼠中，MD SC是Gr-1(由Ly6G和Ly6C组成)和CD11b双阳性的细胞，根据细胞形态及Ly6G、Ly 6C的表达量的高低，又将MDSC分为两个亚型：CD11b⁺Ly6G⁺Ly6C^low粒细胞样MDSC(G- MDSC)和CD11b⁺Ly6G^-Ly6C^hi单核细胞样MDSC(M-MDSC)，其中G-MDSCs主要通过精氨酸酶1(Arginine1，Arg-1)和活性氧(reactive oxygen species，ROS)来抑制T细胞的活化和增殖，M-MDSC则主要通过Arg-1和一氧化氮来发挥抑制作用。