[发明专利]一种海洋真菌来源的苯酚类衍生物的制备方法

权利要求书

1.一种同时制备苯酚类衍生物1-3的方法，其特征在于包括以下步骤：先在菌种培养基中对海洋真菌Penicillium purpurogenum进行菌种培养，再在发酵培养基中对上述海洋真菌进行发酵培养，得发酵物后，用乙酸乙酯萃取2–4次，合并乙酸乙酯萃取液后减压浓缩得粗浸膏，进行色谱分离，分别得到化合物1-3；其中所述的菌种培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、粗海盐、水；所述的发酵培养基中含有大米、粗海盐、水；所述的色谱分离为依次进行正相硅胶柱色谱分离、反相硅胶柱色谱分离、凝胶柱色谱分离和高效液相色谱分离；所述苯酚类衍生物1-3结构如下：

所述海洋真菌Penicillium purpurogenum的菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2017年5月4日；保藏编号：CGMCC No.13778；分类命名：产紫青霉Penicillium purpurogenum。

2.权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的菌种培养基含有葡萄糖1.0％–10％、酵母膏0.1％–4.0％、蛋白胨0.2％–4.0％、琼脂1.0％–6.0％、粗海盐3.0％–10％，其余为水，上述百分含量均为重量百分比；培养温度为15–35℃；培养时间为3–10天。

3.权利要求1-2任一项所述的制备方法，其特征在于所述的发酵培养基中大米、粗海盐和水的含量为每个500mL锥形瓶中含有大米50–150g，粗海盐1–10g，水50–150mL；培养温度为15–35℃；培养时间为20–50天。

4.权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的正相硅胶柱色谱分离为先采用固定相为100～200目硅胶，流动相为50％–60％的乙酸乙酯/石油醚混合溶剂，洗脱体积为3-5个柱体积，然后再采用的固定相为200～300目硅胶，流动相为50％–55％的二氯甲烷/甲醇混合溶剂，洗脱体积为2-3个柱体积；上述流动相混合溶剂的百分比均为体积百分比。

5.权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的反相硅胶柱色谱分离中采用的固定相为C₁₈硅胶，流动相为35％–45％的甲醇/水混合溶剂，洗脱体积为2-3个柱体积；上述流动相混合溶剂的百分比均为体积百分比。

6.权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的凝胶柱色谱分离的固定相为sephadex LH-20，流动相为二氯甲烷，洗脱体积为3-5个柱体积。

7.权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的高效液相色谱分离中采用的色谱为半制备C₁₈色谱柱，Kromasil,7μm,10×250mm，流动相为45％–50％的甲醇/水混合溶液；上述流动相混合溶剂的百分比均为体积百分比。