[发明专利]一种三步法降解烟草薄片果胶含量的方法

权利要求书

1.一种华根霉发酵制备的果胶酶，其特征在于，通过如下生产步骤制备获得：

（1）菌种活化，从保藏培养基上挑取发酵菌株，接种到活化培养基中活化培养2~3d；

所述发酵菌株具体为中国工业微生物菌种保藏中心保藏的保藏号为CICC 41051的华根霉；

（2）制备种子液，将步骤（1）中活化后的菌种接种到种子培养基中，制备种子液；

（3）发酵培养，将步骤（2）中所制备的种子液接种到发酵培养基中，进一步发酵培养；

所述发酵培养基配方为：果胶23.18~56.82 g/L、酵母粉0.98~6.02 g/L，pH=5~6；

（4）制备粗酶液，将步骤（3）中发酵液经抽滤滤去菌体，再经超滤浓缩即可获得粗酶液。

2.如权利要求1所述华根霉发酵制备的果胶酶，其特征在于，步骤（2）中，所述种子培养基配方为： 果胶3g/L，酵母粉15g/L，NaNO₃ 3.0g，MgSO₄•7H₂O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO₄•4H₂O 0.01g，K₂HPO₄ 1.0g，蒸馏水 1.0L，pH=6.0～6.5。

3.如权利要求1所述华根霉发酵制备的果胶酶，其特征在于，发酵培养基配方为：果胶50 g/L、酵母粉3.0g/L。

4.权利要求1~3任一项所述华根霉发酵制备的果胶酶在烟草中的应用，其特征在于，用于烟草薄片加工过程，用于降解一级浸取液、二级浸取液和混合浆中任意一个或几个的果胶成分。

5.如权利要求4所述华根霉发酵制备的果胶酶在烟草中的应用，其特征在于，将果胶酶粗酶液稀释0~50倍后，

用于一级浸取液时，一级浸取液以干重计，一级浸取液：果胶酶粗酶液=1g：1~10mL的比例，将一级浸取液与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，45~55℃、酶解2~4h；

用于二级浸取液时，二级浸取液以干重计，二级浸取液：果胶粗酶液=1g：1~10mL的比例，将二级浸取液与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，45~55℃、酶解2~4h；

用于混合浆时，混合浆以干重计，混合浆：果胶酶粗酶液=1g：1~10mL的比例，将混合浆与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，45~55℃，酶解2~4h。

6.如权利要求5所述华根霉发酵制备的果胶酶在烟草中的应用，其特征在于，将果胶酶粗酶液稀释20倍后，

用于一级浸取液时，一级浸取液以干重计，一级浸取液：果胶酶粗酶液=1g：6mL的比例，将一级浸取液与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，55℃、酶解4h；

用于二级浸取液时，二级浸取液以干重计，二级浸取液：果胶粗酶液=1g：4mL的比例，将二级浸取液与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，55℃、酶解4h；

用于混合浆时，混合浆以干重计，混合浆：果胶酶粗酶液=1g：3mL的比例，将混合浆与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，55℃，酶解3h。

7.利用权利要求1所述华根霉发酵制备的果胶酶的一种三步法降解烟草薄片果胶含量的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

（1）制备粗酶液，并稀释0~50倍后备用，

（2）按现有工艺制备烟草薄片，在烟草薄片制备工艺的一级浸取液、二级浸取液和混合浆中的任意一个或几个过程中应用步骤（1）中所制备粗酶液；

用于一级浸取液时，一级浸取液以干重计，一级浸取液：果胶酶粗酶液=1g：1~10mL的比例，将一级浸取液与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，45~55℃、酶解2~4h；

用于二级浸取液时，二级浸取液以干重计，二级浸取液：果胶粗酶液=1g：1~10mL的比例，将二级浸取液与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，45~55℃、酶解2~4h；

用于混合浆时，混合浆以干重计，混合浆：果胶酶粗酶液=1g：1~10mL的比例，将混合浆与果胶酶粗酶液溶液混合均匀，45~55℃，酶解2~4h。

8.如权利要求7所述三步法降解烟草薄片果胶含量的方法，其特征在于，步骤（2）中，在烟草薄片制备工艺的一级浸取液、二级浸取液和混合浆中均应用粗酶液。