[发明专利]检测黄曲霉毒素M1的核酸适配体、传感器、试剂盒及应用

权利要求书

1.一种用于检测黄曲霉毒素M₁的核酸适配体，其特征在于：其核苷酸为SEQ ID No:1所示。

2.一种检测黄曲霉毒素M₁的核酸适配体传感器，其特征在于：所述核酸适配体传感器由以下四部分组成：

(1)DNA序列A：由以下DNA序列构成的DNA模板：5′-GGTGTGACGGATXaXb-3′；其中，Xa和Xb分别代表a个和b个任意碱基，a＝b＝20—30；

(2)DNA序列B：SEQ ID No:1所述的黄曲霉毒素M₁核酸适配体，其中，在3’端修饰生物素；

(3)PCR引物1，所述PCR引物1的长度为20-30nt，且序列具有如下特征：5’-Xc-3’，5’端的20-30个碱基与DNA序列A的Xb段互补配对；其中，X为任意碱基，c或b为碱基数量，c＝b＝20-30；

(4)PCR引物2，所述PCR引物2的长度为20-30nt，且序列具有如下特征：5’-Xd-3’，5’端的20-30个碱基与DNA序列A的Xa段相同；其中，X代表任意碱基，a或d代表碱基数量，d＝a＝20-30。

3.按照权利要求2所述的核酸适配体传感器，其特征在于：所述DNA序列A的核苷酸序列为SEQ ID No:2所示。

4.按照权利要求2所述的核酸适配体传感器，其特征在于：所述PCR引物1的核苷酸序列为SEQ ID No:3所示。

5.按照权利要求2所述的核酸适配体传感器，其特征在于：所述PCR引物2的核苷酸序列为SEQ ID No:4所示。

6.一种检测黄曲霉毒素M₁的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括以下组分：

(1)PCR管修饰溶液；

(2)传感器溶液；

(3)PCR体系溶液；

(4)黄曲霉毒素M₁提取溶液；

所述传感器溶液包括以下各组分：

权利要求2所述的核酸适配体传感器、PBST缓冲液、杂交缓冲液和Tris缓冲液。

7.按照权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述PCR管修饰溶液包括以下组分：戊二醛溶液、碳酸盐缓冲液、链霉亲和素；所述传感器溶液中DNA序列A的浓度为1×10^-3-10nM；所述传感器溶液中DNA序列B的浓度为5-40nM；所述传感器溶液中PCR引物1和PCR引物2的浓度为5-20μM；

所述的PCR体系溶液包括以下组分：SYBR Green染料，Taq DNA聚合酶，PCR缓冲液，dNTP和水；

所述黄曲霉毒素M₁提取液为甲醇溶液。

8.按照权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：其中，所述戊二醛溶液的浓度为0.8％、碳酸盐缓冲液的浓度为0.01M；链霉亲和素的浓度为2.5-5ng·mL^-1；

所述传感器溶液中DNA序列A的浓度为10nM；

所述传感器溶液中DNA序列B的浓度为10nM；

所述传感器溶液中PCR引物1和PCR引物2的浓度为10μM；

所述甲醇溶液为70％甲醇溶液。

9.按照权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述链霉亲和素的浓度为2.5ng·mL^-1。