[发明专利]多孔陶瓷固定化果胶酶及其在烟草薄片加工过程中的应用

权利要求书

1.一种多孔陶瓷固定化果胶酶，在其特征在于，通过如下步骤制备获得：

（1）菌种活化，从保藏培养基上挑取发酵菌株，接种到活化培养基中活化培养2~3d；

所述发酵菌株具体为中国工业微生物菌种保藏中心保藏的保藏号为CICC 41151的塔宾曲霉；

（2）制备种子液，将步骤（1）中活化后的菌种接种到种子培养基中，24~28℃、120~180rmin摇床培养36~48h，制备种子液；

（3）发酵培养，将步骤（2）中所制备的种子液接种到发酵培养基中，24~28℃、120~180rmin摇床培养4~14h进一步发酵培养，获得发酵液；

所述发酵培养基配方为：果胶50 g/L、蛋白胨2.0g/L，pH=6.2；

（4）制备粗酶液，将步骤（3）中发酵液经抽滤滤去菌体，再经超滤浓缩即可获得粗酶液；

（5）果胶酶的固定化，将步骤（4）中的粗酶液，以多孔陶瓷为载体进行果胶酶固化，再进行戊二醛交联化，以固定果胶酶。

2.如权利要求1所述多孔陶瓷固定化果胶酶，其特征在于，步骤（2）中，所述种子培养基配方为：果胶3g/L，蛋白胨10g/L，NaNO₃ 3.0g，MgSO₄•7H₂O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO₄•4H₂O 0.01g，K₂HPO₄ 1.0g。

3.如权利要求1所述多孔陶瓷固定化果胶酶，其特征在于，步骤（5）中， 所述多孔陶瓷规格为：直径0.4cm、平均孔径650～750nm；戊二醛交联时，以质量浓度1.2~1.6%的戊二醛交联1~3h。

4.权利要求1~6任一项所述多孔陶瓷固定化果胶酶在烟草薄片加工过程中的应用，其特征在于，用于烟草薄片加工时，作用于烟草薄片原料的三级萃取液。

5.如权利要求4所述多孔陶瓷固定化果胶酶在烟草薄片加工过程中的应用，其特征在于，应用时，按多孔陶瓷固定化果胶酶：三级萃取液=1g：1~50mL的比例，将多孔陶瓷固定化果胶酶与三级萃取液混合均匀后，40~50℃、酶解2~6h。

6.如权利要求5所述多孔陶瓷固定化果胶酶在烟草薄片加工过程中的应用，其特征在于，应用时，按多孔陶瓷固定化果胶酶：三级萃取液体积=1g：40mL的比例，将多孔陶瓷固定化果胶酶与三级萃取液混合均匀后，45℃、酶解3h。

7.一种利用权利要求1所述多孔陶瓷固定化果胶酶的针对烟草薄片中果胶的加工方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

（1）制备多孔陶瓷固定化果胶酶；

（2）在烟草薄片原料进行逆流萃取加工过程中的三级萃取液中，加入步骤（1）中所制备多孔陶瓷固定化果胶酶，按多孔陶瓷固定化果胶酶：三级萃取液体积=1g：1~50mL的比例，将多孔陶瓷固定化果胶酶与三级萃取液混合均匀后，40~50℃、酶解2~6h。