[发明专利]一种醒脑静注射液或其中间体中多指标成分含量的测定方法

说明书

本发明公开了一种醒脑静注射液或其中间体中多指标成分含量的测定方法。该方法采用液相色谱分析技术，借助一测多评方法，能以莪术二酮单一对照品对醒脑静注射液或其中间体中的9种指标成分同时进行含量测定。该方法检测灵敏度高，准确性好，能以较低成本对醒脑静注射液或其中间体的质量进行评价，可解决因待测成分对照品缺乏而无法进行含量测定的问题，有助于更全面地对醒脑静注射液进行控制质量。

技术领域

本发明属于中药成分含量测定领域，具体涉及一种醒脑静注射液或其中间体中多指标成分含量的测定方法。

背景技术

醒脑静注射液是由麝香、郁金、栀子、冰片四味中药制成的注射剂，具有清热泻火、凉血解毒、开窍醒脑的功效，临床上主要用于中风、脑缺血、意识障碍、急性酒精中毒等病症。醒脑静注射液的现行质量标准是2003年的国家药品标准(WS₃-B-3353-98-2003)，该标准仅对注射液中的麝香酮进行鉴别，对冰片进行含量测定，而对于栀子、郁金中的成分并没有进行质量控制。

多篇文献报道了对醒脑静注射液中麝香酮和冰片的含量测定方法。有文献报道了对醒脑静注射液中来源于郁金的莪术双环烯酮、莪术烯醇、莪术二酮、莪术酮、吉马酮5个倍半萜类成分的含量测定方法。公开号为CN 105548385 A的中国专利文献公开了一种醒脑静注射液液相指纹图谱测定方法，公开号为CN 102091283 A的中国专利文献公开了一种醒脑静注射液气相指纹图谱测定方法。指纹图谱测定方法虽然能以半定量的方式对注射液质量进行评价，但不能对注射液中各指标成分的含量进行准确测定。

另一方面，栀子在脑血管疾病中的治疗作用已被多篇文献报道，而对于醒脑静注射液中源于栀子的成分目前尚缺少含量测定方法，这不利于实现对该产品的全面质量控制。此外，对于醒脑静注射液中莪术呋喃二烯酮的含量测定方法，目前尚无报道。

由于栀子、郁金中的挥发性成分并不稳定，且莪术酮、莪术双环烯酮、4-亚甲基-异佛尔酮等成分的对照品非常紧缺且价格昂贵，若采用常规的多个对照品外标定量测定方法，分析成本太高。一测多评法是一种基于待测成分间的相对校正因子，以一个内参物对照品代替多个成分对照品进行定量的方法，可用于解决对照品紧缺和检测成本高的问题，是一种适合中药特点的多指标质量评价新模式。因此为了在生产中控制好醒脑静注射液中间体及其成品的质量，很有必要在现有技术基础之上研究设计出能准确且低成本地测定源于栀子和郁金的多指标成分含量的方法。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述问题，基于一测多评法，提供一种能够准确测定醒脑静注射液及其中间体中异佛尔酮、4-亚甲基-异佛尔酮、莪术双环烯酮、莪术烯醇、莪术二酮、莪术酮、莪术呋喃二烯酮、莪术醇和吉马酮9种成分含量的高效液相色谱分析方法。该方法检测灵敏度高，操作简便、实用性高、检测成本低，可以客观、全面、准确地评价醒脑静注射液及其中间体的质量，解决因对照品缺乏而无法准确测定多种指标成分含量的问题。

为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种醒脑静注射液或其中间体中多指标成分含量的测定方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备

直接将醒脑静注射液或其中间体作为供试品溶液进行分析；本发明醒脑静注射液中间体指栀子和郁金的水蒸气蒸馏提取液；

(2)对照品溶液的制备

分别精密称取异佛尔酮、4-亚甲基-异佛尔酮、莪术双环烯酮、莪术烯醇、莪术二酮、莪术酮、莪术呋喃二烯酮、莪术醇、吉马酮9种成分的对照品适量，分别用质量分数为30～100％的甲醇水溶液溶解并定容，制成具有已知浓度的各指标成分的单一对照品储备液；

再分别精密吸取各成分的单一对照品储备液适量，混合后加质量分数为10～50％的甲醇水溶液稀释得到适宜浓度的混合对照品溶液，备用；

(3)相对校正因子的测定