[发明专利]一种检测水果中5种萘衍生物的方法

说明书

本发明涉及一种检测水果中5种萘衍生物的方法,本方法包括：标准溶液的配制、样品提取、样品净化和超高效液相色谱测定等四个步骤，本方法以乙腈为样品提取液；NH₂固相萃取小柱净化，含1％‑2％甲酸的二氯甲烷‑乙腈(90:10‑95:5，V/V)为淋洗液；用1.7μm，2.1×100mm C18色谱柱分离，0.1％(v/v)甲酸水溶液‑0.1％(v/v)甲酸乙腈溶液为流动相；于超高效液相色谱荧光检测器激发波长280nm，发射波长330nm下测定。本方法简便、灵敏、准确，适用于水果中NAD、NAA、2‑NOA、NPA和NAME这5种萘衍生物的同时测定。

技术领域

本发明涉及一种检测水果中5种萘衍生物的方法,属于化学检测领域。

背景技术

植物激素是指植物体内天然存在的对植物生长、发育有显著作用的微量有机物质，也被称为植物天然激素或植物内源激素。由于植物体内的植物激素含量甚微，如果通过从植物体内提取植物激素再应用于农业生产非常困难，成本也很高。于是，人们就用化学的方法，仿照植物激素的作用合成具有类似植物激素功能的有机化合物，这便是植物生长调节剂。植物生长调节剂又称为植物外源激素,属于农药管理范畴，每种植物生长调节剂都有特定的用途，而且应用技术要求相当严格。欧盟、美国、澳大利亚、日本等发达国家对蔬菜水果中植物激素均制定了严格的安全限量控制标准，而且对植物外源激素进行常规检测。

萘衍生物1-萘乙酰胺(NAD)、1-萘乙酸(NAA)、2-萘氧乙酸(2-NOA)、萘丙酸(NPA)和萘乙酸甲酯(NAME)，属生长素类植物生长调节剂，在果树上使用能加强植株的新陈代谢和光合作用，促进细胞分裂与扩大，刺激生长，提高嫁接成活率，促进坐果和增大果粒。我国规定苹果、葡萄和荔枝中NAA 最大残留限量(MRL)分别为0.1，0.1，0.05mg/kg。日本规定NAA在水果、蔬菜等产品中的最大残留限量，范围为0.03-5.0mg/kg，并且规定了NAD在苹果和梨中的限量为0.1mg/kg。欧盟规定NAD、NAA和2-NOA在浆果类水果中的最大残留限量分别为0.05，0.05和0.01mg/kg。

目前关于NAA测定的报道已较多，方法主要有荧光光谱法、气相色谱法 (GC)、液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)、液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)、液相色谱－串联质谱法(HPLC-MS/MS)。而国内外对NAD、2-NOA、NPA和NAME 检测方面的报道都比较少，尤其是NPA和NAME鲜有人报道，还未见有同时测定1-萘乙酰胺(NAD)、1-萘乙酸(NAA)、2-萘氧乙酸(2-NOA)、萘丙酸(NPA) 和萘乙酸甲酯(NAME)5种萘衍生物的方法报道。

发明内容

本发明为了解决上述技术问题，提供一种检测水果中5种萘衍生物的方法,通过本检测方法使1-萘乙酰胺(NAD)、1-萘乙酸(NAA)、2-萘氧乙酸 (2-NOA)、萘丙酸(NPA)和萘乙酸甲酯(NAME)5种萘衍生物达到很好的分离，建立同时检测水果中5种萘衍生物的前处理方法和检测方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种检测水果中5种萘衍生物的方法,包括：

1)标准溶液的配制

1.0mg/mL标准溶液：分别称取NAD、NAA、2-NOA、NPA和NAME标准品各 10.0mg，用甲醇溶解并转移至10mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，混匀后贮存于密闭的棕色玻璃瓶中，分别配制成1.0mg/mL的NAD、NAA、2-NOA、NPA 和NAME标准溶液；

10mg/L混合标准溶液：分别移取1.0mg/mL的NAD、NAA、2-NOA、NPA 和NAME标准溶液各0.1mL混合于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，混匀后贮存于密闭的棕色玻璃瓶中，配制成10mg/L混合标准溶液；