[发明专利]一种使用构建的基因VII型新城疫病毒弱毒株制备的疫苗有效
申请号: | 201710388333.X | 申请日: | 2017-05-27 |
公开(公告)号: | CN107158369B | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 李明义;孙化露;金红岩;李思菲;于泽坤;毕云英;刘阳;单学强;栾志舫;马礼照;李朝阳 | 申请(专利权)人: | 山东信得科技股份有限公司;青岛信得药业有限公司 |
主分类号: | A61K39/17 | 分类号: | A61K39/17;A61P31/14;C12N15/85;C12N7/00;C12R1/93 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 262200 山东省潍坊市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 使用 构建 基因 vii 新城 疫病 毒弱毒株 制备 疫苗 | ||
1.一种VII型新城疫病毒疫苗,其特征在于,所述的疫苗的抗原为灭活的VII型新城疫病毒疫苗弱毒株,所述的弱毒株是通过反向遗传操作方法来构建的,将VII型新城疫病毒的P蛋白的237位和240位的氨基酸分别突变为苏氨酸T和异亮氨酸I;同时将VII型新城疫病毒的F蛋白同时进行弱毒性突变构建的;所述的弱毒株的保藏编号为CCTCC NO:V201709。
2.如权利要求1所述的疫苗,其特征在于,所述的反向遗传操作方法包括如下的步骤:
构建表达T7 RNA聚合酶的细胞系,是将表达T7 RNA聚合酶的基因与载体PCI-neo连接后转染DF1细胞获得的;
提供基因VII型新城疫病毒NDV拯救过程中需要的辅助重组质粒和一个全基因组重组载体,辅助重组质粒分别包含NDV的NP蛋白、P蛋白、F蛋白和L蛋白基因;其中P蛋白的237位和240位的氨基酸分别为T和I;
将辅助重组质粒和一个全基因组重组载体转入到表达T7 RNA聚合酶的细胞系中,培养获得基因VII型新城疫病毒弱毒株。
3.如权利要求1所述的疫苗,其特征在于,所述的VII型新城疫病毒疫苗弱毒株用甲醛溶液进行灭活。
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