[发明专利]一种生物组织稳定保护剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属生物检测技术领域，更具体地说，本发明涉及一种能实现在常温条件下对流产组织进行保存和运输且对后续检测结果无影响的生物组织稳定保护剂及其制备方法和应用。

背景技术

从生物组织中提取到的DNA在疾病检测及治疗、法医鉴定等领域应用广泛。但由于生物组织样品离体后，其DNA很容易降解；质量差的生物组织对于后续科研、检测工作的重要性就会大大降低，或者毫无作用，甚至起误导作用。

近年来，对流产组织提取的DNA进行基因检测，从而查找流产、死胎、B超异常、多发畸形胎儿的遗传原因，对遗传疾病的防治具有重要意义。但从新鲜流产组织中提取DNA时，样品若不能马上处理，通常需要立即保存于液氮，而液氮和超低温冰箱并不能普及到每个实验室或者医院，并且液氮和超低温冰箱的维护也需要较高的费用。另外，液氮虽然可以解决保存问题，但仍然无法有效解决样品的运输问题。目前多使用干冰对样品进行保存，再进行异地运输，该方法运输条件要求高、成本高，存在采样、运输过程复杂，不利于新鲜样品的采样等问题。

有鉴于此，确有必要提供一种安全的、能实现在常温条件下对流产组织进行保存和运输且对后续检测结果无影响的生物组织稳定保护剂及其制备方法和应用。

发明内容

本发明的目的在于：克服现有生物组织保存和运输时存在的缺陷，提供一种安全的、能实现在常温条件下对流产组织进行保存和运输且对后续检测结果无影响的生物组织稳定保护剂及其制备方法和应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种生物组织稳定保护剂，其pH值为6～8，包括：氯化锂0.3～3mol/L，Tris-HCl 5～50mmol/L，尿素0.1～0.3mol/L，质量体积分数为0.5～5％的SDS，EDTA 1～10mmol/L，体积分数为10～90％的乙醇。

作为本发明生物组织稳定保护剂的一种改进，所述生物组织稳定保护剂的pH值为8，包括：氯化锂0.71mol/L，Tris-HCl 30mmol/L，尿素0.71mol/L，质量体积分数为0.5％的SDS，EDTA 3.6mmol/L，体积分数为70％的乙醇。

本发明生物组织稳定保护剂中，乙醇、尿素和SDS为抑菌剂和蛋白质变性剂，可有效抑制常温下生物组织中的微生物滋生和繁殖；EDTA作为螯合剂，可以螯合镁离子等核酸酶的激活剂，从而抑制核酸酶对DNA的降解作用，实现对DNA的有效保护；氯化锂作为还原剂，可以中和生物组织保存时的一些氧化剂的作用，避免产生微生物滋生繁殖的环境；Tris-HCl作为缓冲溶液，可以维持生物组织稳定保护剂的pH值在8左右。

为了实现上述发明目的，本发明还提供了一种生物组织稳定保护剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)按照用量称量生物组织稳定保护剂的各组分后，将各组分混合搅拌定容；

(2)调节溶液的pH值；

(3)过滤除菌，得到生物组织稳定保护剂。

作为本发明生物组织稳定保护剂的制备方法的一种改进，步骤(1)中，所述定容是使用去离子水进行定容。

作为本发明生物组织稳定保护剂的制备方法的一种改进，步骤(2)中，所述调节溶液的pH值是使用氢氧化钠溶液调节。

作为本发明生物组织稳定保护剂的制备方法的一种改进，步骤(3)中，所述过滤除菌是使用40微米微孔滤膜进行过滤除菌。

本发明生物组织稳定保护剂可用于稳定保护离体生物组织，特别是用于保护非冷冻状态下的离体生物组织DNA的完整性；其中，生物组织可以是人流产组织。

相对于现有技术，本发明生物组织稳定保护剂及其制备方法和应用具有如下优点：

(1)本发明生物组织稳定保护剂是一种无毒液体，可迅速稳定离体的生物组织，并能长期保持生物组织中DNA的完整性，有效避免生物组织中微生物的滋生。

(2)本发明生物组织稳定保护剂可以不受时间和地点的限制，及时收集生物组织样本，且无需将其置于液氮中冷冻或立即放冰箱冷冻，大大提高了生物组织样品收集的可操作性。

(3)本发明生物组织稳定保护剂可对浸入其中的生物组织实现较长时间的常温保存，因此可在常温条件下对流产组织进行运输，降低了成本且对后续检测结果无影响，可应用于实验室、医疗等多个领域的生物检测中，具有很好的推广应用前景。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式，对本发明生物组织稳定保护剂及其制备方法和应用以及有益效果进行详细说明。