[发明专利]一种基因VII型新城疫弱病毒株

说明书

本发明提供一种基因VII型新城疫病毒弱毒株WF株，其保藏编号为CCTCC NO:V201708；所述的WF株的P蛋白的第237位和第240位氨基酸发生了突变，其中第237位为苏氨酸，第240位为异亮氨酸。本发明通过自然筛选别获得的疫苗侯选株WF株，通过做成疫苗免疫动物后发现，能诱导产生较高的中和抗体，能抵抗强毒力基因VII型新城疫病毒的侵害，有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于疫苗用病毒株筛选技术领域，具体涉及一种基因VII型新城疫弱病毒株。

技术背景

新城疫是由新城疫病毒引起的一种急性烈性传染病，对养禽业的危害极大，曾经被国际兽疫局(OIE)列为A类病。ND于1926年首先被发现于印度尼西亚爪哇，同年发现于英国的纽卡斯尔城，此后迅速向世界各地传播。目前ND已在世界范围内发生了四次大流行，并且宿主范围不断扩大。

刘秀梵等对1985‐2003年分离自江苏浙江地区的29株新城疫病毒进行序列分析，结果显示有17株属于基因VII型，其中10株分离自发病鹅群。刘华雷等对2005年分离自中国大陆地区的83株新城疫病毒进行分析显示，其中64株属于基因VII型。Lien等对2003‐2006年间分离自台湾地区的20株新城疫病毒均为基因VII型。此外同阶段中国周边的韩国和日本流行的NDV也大都为基因VII型。我们对本实验室近年分离的部分NDV毒株也进行了测序分析，结果显示，70％以上的毒株为基因VII型。由此看出，基因VII型新城疫病毒在中国禽群中广泛流行，是目前的绝对优势基因型。

当前市场上对新城疫病毒的防控主要使用IV系疫苗株Lasota、clone30和II系疫苗株B1等基因II型的毒株，它们虽然可以提供一定的免疫保护，但是不能完全阻止新城疫病毒的传播、扩散，特别是基因VII型新城疫病毒的流行给养殖业造成了巨大的经济损失。由于流行的基因VII型新城疫病毒都是强毒，因此大多数毒株不适合作为疫苗株使用，除非是自然弱毒株或是基因工程手段人工致弱的毒株。获得弱毒株是生产疫苗的关键。

发明内容

本发明的目的是提供一种基因VII型新城疫弱病毒株，从而弥补现有技术的不足。

本发明提供一种基因VII型新城疫病毒弱毒株WF株，其于2017年3月7日保藏于中国武汉、武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:V201708；

所述的WF株的P蛋白的第237位和第240位氨基酸发生了突变，其中第237位为苏氨酸(T)，第240位为异亮氨酸(I)。

上述WF株用于制备疫苗；

所述的疫苗，优选为灭活疫苗。

本发明通过自然筛选别获得的疫苗侯选株WF株，通过做成疫苗免疫动物后发现，均能诱导产生较高的中和抗体，能抵抗强毒力基因VII型新城疫病毒的侵害，有广阔的应用前景。

附图说明

图1：新城疫F基因片段PCR鉴定图；

图2：NDV毒株(WF株、SL株)基于F基因片段的系统发生树；

图3：新城疫9个基因片段PCR鉴定结果图；

图4：全基因组分段构建PCR鉴定结果图；

图5：NP、P、L辅助质粒酶切鉴定图。

具体实施方式