[发明专利]一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法

说明书

本发明提供了一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法，应用于品种分子鉴定及品种管理。其特征在于筛选鉴别云瑞系列玉米品种的4对核心引物和优化的PCR反应体系，进行品种DNA信息的数字化编码赋值，形成二维码表述，并标识于商品种子包装上，用于玉米优良品种种子的防伪和溯源。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种云瑞系列玉米品种DNA分子标签的建立，应用于品种分子鉴定及品种管理。

背景技术

云南隶属西南，属于我国西南山地玉米种植区，虽然云南省不是我国玉米主产省份，但拥有得天独厚的自然环境及气候资源，为玉米种质资源的选择提供了更多的可能性。云瑞系列新品种(系)是由云南省农业科学院选育的一系列在云南省最具代表性的玉米品种(系)，具有产量高、抗病、抗逆性强、品质优、综合性状良好等特点，社会效益和经济效益显著。该系列品种已在我国云南、四川、贵州、广西等周边省区累计推广4000多万亩。为广大农户所喜爱。

随着我国育种水平的不断提升，新育成品种不断涌现，但“品种同质化”现象也日趋严重，市场上“同源不同名”、“套牌品种”等现象屡见不鲜，对我国品种管理造成了很大麻烦，在打击原创育种的同时也给国家和农民利益造成很大的损害。因此，要解决这一难题，需建立起一种简便、快速、准确的品种识别及科学的种子管理方法。品种识别及科学的种子管理需要达到唯一性、可识别(鉴别)性、可追溯性的要求。

品种DNA分子标签即品种DNA身份信息标签，可作为品种特异识别的一个标准，是品种数字化管理的核心技术之一。

发明内容

为了能够准确、快速、方便的识别云瑞系列玉米品种，本发明提供一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法。

本发明的技术方案如下：

1.一种建立云瑞系列玉米品种DNA分子标签的方法，包括(1)云瑞系列玉米品种基因组DNA提取、(2)PCR扩增、(3)PCR产物的毛细管电泳荧光检测、(4)DNA指纹数据的获得、(5)云瑞系列玉米品种基本商品信息数据的采集、(6)云瑞系列玉米品种DNA分子标签制作，在所述(2)PCR扩增中每一个云瑞系列玉米品种提取的基因组DNA，分别用引物bnlg1191、bnlg1940k7、umc2007y4、bnlg2305k4进行扩增，所述的引物bnlg1191由bnlg1191正向引物和bnlg1191反向引物组成，所述的bnlg1191正向引物的碱基序列如SEQ ID NO：1所示，bnlg1191反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：2所示；所述引物bnlg1940k7由bnlg1940k7正向引物和bnlg1940k7反向引物组成，所述bnlg1940k7正向引物的碱基序列如SEQ ID NO：3所示，bnlg1940k7反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：4所示；所述引物umc2007y4由umc2007y4正向引物和umc2007y4反向引物组成，所述umc2007y4正向引物的碱基序列如SEQID NO：5所示，umc2007y4反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：6所示；所述引物bnlg2305k4由bnlg2305k4正向引物和bnlg2305k4反向引物组成，所述bnlg2305k4正向引物的碱基序列如SEQ ID NO：7所示，bnlg2305k4反向引物的碱基序列如SEQ ID NO：8所示；

在所述(4)DNA指纹数据的获得中每一个云瑞系列玉米品种的DNA指纹数据的获得是根据毛细管荧光电泳读出的该云瑞系列玉米品种4个位点的等位变异片段大小数据，纯合位点的等位变异记录为X/X，以X/X的形式表示其DNA指纹数据，杂合位点的等位变异记录为X/Y，以X/Y的形式表示其DNA指纹数据，其中X、Y为该位点上两个不同的等位变异片段大小数据，小片段在前，大片段在后，以两个片段大小记录；每一个云瑞系列玉米品种的DNA指纹数据X/Y或X/Y依次按引物bnlg1191、引物bnlg1940k7、引物umc2007y4、引物bnlg2305k4的引物顺序排列；