[发明专利]一种生产羊抗人血清淀粉样蛋白A抗血清的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物工程领域，具体涉及一种生产羊抗人血清淀粉样蛋白A抗血清的方法。

背景技术

人血清淀粉样蛋白A（SAA）是一种急性相蛋白并与血浆高密度脂蛋白(HDL)结合。

抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。一种抗原能否引起抗体生成反应，一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇（Antigenic determinant），另一方面取决于机体的免疫状态，当具备以上两个条件后，抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。抗原的种类繁多，包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂，尤其在使用可溶性抗原时，以期得到高效价的抗血清；合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物，方可获得理想的免疫效果。使用佐剂后可增加抗原的免疫原性和延长抗原在机体内存留的时间，从而改变了抗原原有的免疫原性。

动物免疫系统是动物在种系发生和个体发育过程中逐渐进化和完善起来的，是机体执行免疫功能的组织机构，是产生免疫应答的物质基础。动物免疫系统是由免疫器官、免疫细胞和免疫分子组成的。

目前，将人血清淀粉样蛋白A（SAA）抗原与佐剂乳化后，按一定的程序免疫动物，可在动物血清中产生抗人的SAA抗体。虽然目前的生产方法都可以产生一定量的抗体，但是抗体产生速度慢，水平较低，且抗原用量高。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种能提高抗体效价、降低抗原用量的生产羊抗人血清淀粉样蛋白A抗血清的方法。

为达到上述目的，本发明是通过以下的技术方案来实现的。

一种生产羊抗人血清淀粉样蛋白A抗血清的方法，该方法包括以下步骤：

（1）抗原准备：选用人血清淀粉样蛋白A（SAA）抗原，注射前以弗氏佐剂进行乳化得抗原乳剂；

（2）第一次注射：使用上述抗原乳剂对羊进行注射；在动物体上选取22个部位点进行注射；

（3）第二次注射：第一次注射后14天进行第二次注射；

（4）第三次注射：第二次注射后12天进行第三次注射；

（5）第四次注射：第三次注射后10天进行第四次注射；

（6）第五次注射：第四次注射后8天进行第五次注射；

（7）第六次注射：第五次注射后8天进行第六次注射；

（8）第七次注射：第六次注射后8 天进行第七次注射；

（9）第八次注射：第七次注射后8 天进行第八次注射；

（9）血清效价检测：最后一次注射后8-10 天采血，分离血清，检测其双扩效价；

第二次至第八次的免疫注射部位均在动物体上选取8-16个部位点进行注射。

作为本发明的进一步改进，第一次注射前乳化用的弗氏佐剂为完全弗氏佐剂，第二次、第三次、第四次、第五次、第六次、第七次注射前乳化用的弗氏佐剂为不完全弗氏佐剂。

作为本发明的进一步改进，所述22个部位点分别为：后足窝各1点、颌下淋巴结左右各1点、腋窝周围左右各2点、股淋巴结周围各3点、背部脊柱左右两侧各4点。

作为本发明的进一步改进，第二次至第八次的免疫注射部位分别为：腹股沟、腋部、颈部、背部皮下多点注射，每个部位1-2 点，共计8-16 点。

作为本发明的进一步改进，第一次注射的剂量为每只羊0.55mg，每一针剂量平均分配。

作为本发明的进一步改进，第二次免疫剂量是第一次的2倍。

作为本发明的进一步改进，第三次、第四次、第五次、第六次、第七次注射的剂量均为第二次的2倍量，每一针剂量平均分配。

有益效果：与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明生产羊抗人血清淀粉样蛋白A抗血清的方法，成本低，过程简单，不仅能稳定生产抗体，并且产生抗体速度快，抗体水平高，抗原用量小；还能缩短免疫周期，节约生产成本。能克服各羊只之间的个体差异，抗体效价整齐划一，能为IVD行业提供稳定的的原料：使生物科技在动物抗体制备方面规模化生产成为可能。

具体实施方式

下面结合实例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1：一种生产羊抗人血清淀粉样蛋白A抗血清的方法，该方法包括以下步骤：