[发明专利]用于制备乙肝疫苗的组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及乙肝疫苗预防和治疗的技术领域，更具体地说，涉及一种用于制备乙肝疫苗的组合物及其制备方法和应用。

背景技术

乙肝疫苗是用于预防乙肝的药物。疫苗接种后，可刺激免疫系统产生保护性抗体，从而使人体具有了预防乙肝的免疫力，达到预防乙肝感染的目的。但是我国感染乙肝病毒(HBV)的人群有9000万人，其中慢性乙肝患者有2000万人。对于慢性乙肝感染者和患者，预防性乙肝疫苗基本无效。因此非常需要一种既能预防又能清除乙肝病毒慢性感染的“治疗性乙肝疫苗”。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于制备乙肝疫苗的组合物及其制备方法和应用，解决了现有技术中的乙肝疫苗不能同时预防和清除乙肝病毒慢性感染的问题。

本发明解决技术问题所采用的技术方案是：一种用于制备乙肝疫苗的组合物，其特征在于，包含免疫激动剂活化酯、HBsAg以及铝佐剂，其中组成比例为：免疫激动剂活化酯：HBsAg：Al＝n：m：q，HBsAg代表重组乙肝表面抗原，Al代表铝佐剂中的铝；n、m、q分别代表免疫激动剂活化酯、HBsAg、Al的摩尔数或重量比，且代表性的摩尔数比为n:m:q＝4:1:18181；其中免疫激动剂活化酯(T7)的结构式如下：

其中，R为OH或SH。

在本发明的组合物中，HBsAg的氨基酸序列包括200-400个氨基酸，HBsAg的分子量为20000Da-44000Da。

在本发明的组合物中，HBsAg的氨基酸序列包括200-250个氨基酸；HBsAg的分子量为20000Da-25000Da。

在本发明的组合物中，HBsAg的氨基酸序列如下：

Met Glu Asn Ile Thr Ser Gly Phe Leu Gly Pro Leu Leu Val Leu Gln Ala Gly Phe Phe Leu Leu Thr Arg Ile Leu Thr Ile Pro Gln Ser Leu Asp Ser Trp Trp Thr Ser Leu Asn Phe Leu Gly Gly Ser Pro Val Cys Leu Gly Gln AsnSer Gln Ser Pro Thr Ser Asn His Ser Pro Thr Ser Cys Pro Pro Ile Cys Pro Gly Tyr Arg Trp Met Gys Leu Arg Arhg Phe Ile Ile Phe Leu Phe Ile Leu Leu Leu Cys Leu Ile Phe Leu Leu Val Leu Leu Asp Tyr Gln Gly Met Leu Pro Val Cys Pro Leu Ile Pro Gly Ser Thr Thr Thr ser Thr Gly Pro Cys Lys Thr Cys Thr Thr Pro Ala Gln Gly Asn Ser Met Phe Pro Ser Cys Cys Cys Thr Lys Pro Thr Asp Gly Asn Cys Thr Cys Ile Pro Ile Pro Ser Ser Trp Ala Phe Ala Lys Tyr Leu Trp Glu Trp Ala Ser Val Arg Phe Ser Trp Leu Ser Leu Leu Val Pro Phe Val Gln Trp Phe Val Gly Leu Ser Pro Thr Val Trp Leu Ser Ala Ile Trp Met Met Trp Tyr Trp Gly Pro Ser Leu Tyr Ser Ile Val Ser Pro Phe Ile Pro Leu Leu Pro Ile Phe Phe Cys Leu Trp Val Tyr Ile。

在本发明的组合物中，所述铝佐剂为氢氧化铝凝胶、磷酸铝、硫酸铝、铵明矾或钾明矾。

在本发明的组合物中，所述免疫激动剂活化酯的制备方法包括：将反应起始物溶于无水DMF中，分批加入EDC和NHS，室温反应，将反应液倒入冰水中，抽滤，水洗，干燥，得白色固体状的免疫激动剂活化酯；所述反应起始物与无水DMF的质量体积比为0.075g/ml-0.1g/ml；所述EDC的加入量与所述反应起始物的质量比为0.45-0.6；所述NHS的加入量与所述反应起始物的质量比为0.25-0.4；

其中，反应起始物的结构式为：

在本发明的组合物中，室温反应的时间为1.5h-4h。