[发明专利]一种构建的基因VII型新城疫病毒弱毒株有效
申请号: | 201710404089.1 | 申请日: | 2017-05-27 |
公开(公告)号: | CN107177560B | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 李明义;孙化露;金红岩;李思菲;于泽坤;毕云英;刘阳;单学强;栾志舫;马礼照;李朝阳 | 申请(专利权)人: | 山东信得科技股份有限公司;青岛信得药业有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12N15/85;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/93 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 曾庆国 |
地址: | 262200 山东省潍坊市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 构建 基因 vii 新城 疫病 毒弱毒株 | ||
1.一种VII型新城疫病毒弱毒株,其特征在于,所述的弱毒株的保藏编号为CCTCC NO:V201709;
所述的弱毒株是将VII型新城疫病毒的P蛋白的237位和240位的氨基酸分别突变为苏氨酸T和异亮氨酸I;同时将VII型新城疫病毒的F蛋白同时进行弱毒性突变构建的;
所述的弱毒株是通过反向遗传操作方法来构建的,所述的反向遗传操作方法包括如下的步骤:
构建表达T7 RNA聚合酶的细胞系;
提供基因VII型新城疫病毒NDV拯救过程中需要的辅助重组质粒和一个全基因组重组载体,辅助重组质粒分别包含NDV的NP蛋白、P蛋白、F蛋白和L蛋白基因;其中P蛋白的237位和240位的氨基酸分别为T和I;
将辅助重组质粒和一个全基因组重组载体转入到表达T7 RNA聚合酶的细胞系中,培养获得基因VII型新城疫病毒弱毒株;
所述的细胞系,是将表达T7 RNA聚合酶的基因与载体PCI-neo连接后转染DF1细胞获得的。
2.权利要求1所述的弱毒株在制备灭活疫苗中的应用。
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