[发明专利]一种利用L‑丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法在审
申请号: | 201710410683.1 | 申请日: | 2017-06-03 |
公开(公告)号: | CN107164247A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 刘洋;李慧荣;徐建;唐思青;刘志成;邓杰勇 | 申请(专利权)人: | 秦皇岛华恒生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16 |
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地址: | 066200 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 丙氨酸 发酵 废弃物 培养 酵母 方法 | ||
技术领域
本发明涉及酵母发酵培养技术领域,特别是一种利用L-丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法。
背景技术
生物发酵企业在发酵生产各种氨基酸过程中,产生大量的废弃物,该废弃物中具有COD、SO42-、PO43-和NH3-N含量高等特点,并且含有大量的废弃菌体,其中富含蛋白质、核酸等营养物质。目前对于该废弃物的处理方法成本高、难度大,如何有效地利用废弃菌体蛋白是需要解决的问题。
酵母作为单细胞蛋白有很大的利用价值,其主要成分是蛋白质,蛋白质几乎占了酵母干物质一半的含量,而且人体必需氨基酸含量充足,尤其富含谷物中较缺乏的赖氨酸;另一方面,还含有大量维生素B1、维生素B2及尼克酸。不仅如此,其氨基酸比例接近联合国粮农组织(FAO)推荐的较理想的氨基酸组成值。酵母对培养基要求不高,能利用多种蛋白和氨基酸做氮源。
发明内容
针对上述问题,本发明提供了一种利用L-丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法,满足现代产业自动化、连续化的需求。
一种利用L-丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法,首先滤出L-丙氨酸发酵液中的菌体和大分子蛋白;然后用酸水解法对滤出的菌体和大分子蛋白进行水解,形成废弃菌体蛋白水解液;再用碱性试剂将废弃菌体蛋白水解液PH值中和至6.8~7.2,最后用中和后的废弃菌体蛋白水解液配制酵母发酵培养基。
进一步的,将过滤得到的菌体和大分子蛋白配制成浓度为10g/100mL~30g/100mL的废弃菌体蛋白液,然后再对其进行酸水解;所述酸水解PH值条件为0.5~2.5,温度条件为85~115℃,水解时间控制在24~72h。
进一步的,所述废弃菌体蛋白水解液占酵母发酵培养基总体积的5%~25%。
进一步的,所述酵母发酵培养基中还包括辅助因子,所述辅助因子为酵母粉、大豆蛋白胨、牛肉膏蛋白胨、葡萄糖、无机微量元素中任意一种或多种的组合;所述酵母粉浓度控制在5~10g/L,所述大豆蛋白胨浓度控制在5~10g/L,所述牛肉膏蛋白胨浓度控制在5~10g/L,所述葡萄糖浓度控制在1~4%,所述无机微量元素浓度控制在6~10mg/L。
进一步的,所述酵母发酵培养基为5~25%的废弃菌体蛋白水解液、0.5~1%的大豆蛋白胨、1~4%的葡萄糖、6~10mg/L的无机微量元素依次加入水中,搅拌均匀,然后在115~121℃温度下维持30min进行灭菌处理,再降温至25~30℃,配制而成。
进一步的,所述酵母菌采用酿酒酵母,所述酵母菌在所述酵母发酵培养基中的接种量控制在3%~10%,并在25~35℃温度下培养3~5d。
本发明直接水解L-丙氨酸废弃物作为酵母发酵原料,为酵母培养提供了丰富的氨基酸氮源,可作为微生物发酵养料,实现了废物的重新利用,降低了酵母发酵培养基的成本;酵母在其配制而成的培养基中生长良好,显著降低发酵法生产L-丙氨酸过程中发酵废弃物的处理量,不仅减少环境污染,而且大大提高其附加值。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
将200 L L-丙氨酸发酵液通过陶瓷膜进行过滤,得到L-丙氨酸废弃物。L-丙氨酸废弃物初始pH值为6.98,将L-丙氨酸废弃物调节成浓度30 g/100 mL废弃液,用6 mol/L的盐酸溶液调节pH值至0.5,在95℃温度下水解72 h,既得废弃菌体蛋白水解液;然后用6 mol/L的氢氧化钠溶液将废弃菌体蛋白水解液中和pH值至 7.2。
按照质量比取各原料备用,其中废弃菌体蛋白水解液15%,大豆蛋白胨2.5%,葡萄糖7%,无机微量元素6 mg/L,其余为水;将废弃菌体蛋白水解液、大豆蛋白胨、葡萄糖及无机微量元素依次加入水中,搅拌均匀,然后在温度115℃条件下维持时间30 min进行灭菌处理,再降温至25~35℃,制得酵母发酵培养基。
以下通过对照组实验,说明本发明对于酵母培养的可行性及其效果。
对照组:发酵培养基采用3%酵母粉、4%大豆蛋白胨、4%葡萄糖及6 mg/L无机微量元素,其余为水。
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