[发明专利]OTUD 5的单克隆抗体制备及其在癌症治疗中的用途

说明书

OTUD 5的单克隆抗体制备及其在癌症治疗中的用途，本发明通过大量的实验和数据分析发现了OTUD 5与乳腺癌的发生和转移表达密切相关，OTUD 5可以作为治疗靶标用于乳腺癌的治疗中的用途。另外，通过提供了改进的OTUD 5单克隆抗体，所述抗体均具有较好的结合特性。

技术领域

本发明涉及OTUD 5的单克隆抗体在癌症治疗中的用途，属于医药生物技术领域。

背景技术

泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin―proteasome pathway)是细胞内一个重要的蛋白质降解调节系统。通过对底物蛋白的多聚泛素化并经蛋白酶体降解，可以影响或调节多种细胞活动，包括：基因转录、细胞周期调节、免疫反应、细胞受体功能及肿瘤生长、炎症过程等。该途径也是一个被严格调控的可逆过程，其中去泛素化酶的调节就是一个重要的环节。目前研究证实，细胞内广泛存在许多去泛素化酶(deubiquitinating enzymes，DUBs)，主要分为以泛素羧基末端水解酶家族和泛素特异性加工酶家族为主的5种类型。其中OUT(Otubain Protease)家族是重要的家族成员之一。

发明人在前期的研究发现，OTUD1的表达在癌症病人中明显的丢失。发现一些乳腺癌病人OTUD1的表达很低，这是由于OTDU1基因的缺失甚至删除，而且OTUD 1缺失的病人往往和预后不良有关。RAS活性的增加和P53表达的缺失往往是恶性肿瘤的特点。已经发现HRAS的增加和P53的缺失能够协同作用促进在乳腺癌肿瘤中OTUD1的低表达。重要的是，OTUD1基因的缺失发生在很多类型的的癌症中，例如胶质瘤和肺癌，说明OTUD 1作为抑癌基因不仅仅局限于乳腺癌。OTUD1表达低的肺癌病人比OTUDI表达高的肺癌病人存活时间短。而且，在乳腺癌组织微阵列芯片分析中，OTUD1和SMAD7的表达正相关，进一步支持了OTUD 1能够稳定并调节SMAD7的功能。不仅如此，在异位移植的裸鼠模型中，OTUD1的缺失与乳腺癌肿瘤密切相关。

目前，体内和体外证据都证明OTUD1在TGF-p/SMAD诱导的肿瘤转移过程中的重要功能。另外，作为SMAD7的去泛素化酶，OTUD 1反映了一个新颖的重要的分子机制来调节SMAD7的活性，从而调控TGF-p/SMAD信号通路。

为了探究OTUD 1在癌症中的临床意义，分析了TOGA数据库，发现OTUD 1在很多类型中的癌症中都发生了缺失甚至丢失，在胶质母细胞瘤、黑色素瘤和肺癌中丢失的比例都超过了50％。这些结果有力的证明了OTUD 1的丢失能够导致癌症的发展。

既然OTUD 1能够调节肿瘤转移，OTUD1是一个癌症晚期相关的基因。Oncomine数据库分析表明OTUD 1的mRNA水平在多种癌症类型的病人中高度下调，包括常见的乳腺癌、结直肠癌、肺癌、淋巴癌等。其中在浸润性导管乳腺癌(Invasive Ductal Breast Carcinoma,IDBC)和肺癌(Lung Adenocarcinoma,LA)中，OTUD1比正常人群下调了2倍多。利用NKI295乳腺癌数据库，我们发现低表达的OTUD 1和病人的预后不良正相关。这些特征不仅在乳腺癌中，在TOGA数据库中，相比于OTUD 1高表达的膀胱癌病人，OTUD 1低表达的膀胱癌病人有更短的生存时间。而且OTUD 1诱导的致癌性反应，从而抑制乳腺癌转移通过去除SMAD7的泛素化，抑制TGF-β。

虽然目前研究的很充分，但是针对其他OUT家族的研究还没有涉及。特别是针对OTUD 5与癌症的关系以及相应的单克隆抗体还没有涉及，发明人在此提供了一种新的高结合特异性的OTUD 5单克隆抗体。

发明内容

根据第一方面，本发明从裸鼠体内筛选出OTUD5作为一个新的乳腺癌转移的抑制基因。

本发明提供一种制备治疗乳腺癌转移的药物用途。其中药物未特异性的下调OTUD5的表达。

本发明的另外一方面，所属下调OTUD5的表达通过干扰或者抗体实现的。