[发明专利]一种抗体偶联载药纳米粒子的制备方法

权利要求书

1.一种抗体偶联载药纳米粒子的制备方法，其结构特征在于：所述的两亲性高分子载体材料是由亲水性的马来酰胺修饰的羧基聚乙二醇与疏水性小分子抗癌药物紫檀芪结合形成。

2.一种制备权利要求1所述的抗体偶联载药纳米粒子的制备方法步骤如下：

(1) 两亲性高分子载体材料聚乙二醇-紫檀芪结合物的制备：以紫檀芪为原料，在N₂保护下，将紫檀芪、聚乙二醇溶于有机溶剂中，0°C下加入有机碱作为催化剂反应1小时，然后移至室温下反应24 h；待反应结束后，磷酸缓冲盐溶液(PBS)透析6 h，过滤冷冻干燥，然后得到纯度95%以上的聚乙二醇-紫檀芪结合物；

(2) 载药纳米粒子的制备: 将(1)所述的聚乙二醇-紫檀芪结合物与10-羟基喜树碱溶于二甲基亚砜(DMSO)中，然后逐滴加入到搅拌的水溶液中自组装形成聚乙二醇-紫檀芪/10-羟基喜树碱载药纳米粒子；PBS透析3h，滤膜过滤后，冷冻干燥；

(3) 利用还原剂打开抗体分子间的二硫键，得到含游离巯基的抗体分子；

(4) 含有游离巯基的抗体分子与聚乙二醇-紫檀芪/10-羟基喜树碱载药纳米粒子利用硫醚键连接，透析过滤得到抗体修饰的靶向纳米药物载体粒子。

3.根据权利要求2所述抗体偶联载药纳米粒子额制备方法，其特征在于，所述的有机溶剂为二氯甲烷(DCM)、DMSO中的一种。

4.根据权利要求2所述抗体偶联载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的聚乙二醇为马来酰胺修饰的羧基聚乙二醇，分子量为7500道尔顿。

5.根据权利要求2所述抗体偶联载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的有机碱为可溶于水的碳二亚胺(EDC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)。

6.根据权利要求2所述抗体偶联载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的有机碱EDC和DMAP与紫檀芪的摩尔比分别为1:1和1:2。

7.根据权利要求2所述抗体偶联载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的的透析袋截留分子量为7,500 道尔顿。

8.根据权利要求2所述抗体偶联载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的的还原剂为三(2-羧乙基)膦(TECP)、二硫苏糖醇(DTT)的一种。

9.根据权利要求2所述抗体偶联载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的两亲性高分子载体材料具有核壳双层结构，外层为亲水性的聚乙二醇，内层为疏水药物分子包裹层。