[发明专利]一种竹节虾虾头ACE抑制肽及其制备方法

权利要求书

1.一种竹节虾虾头ACE抑制肽，其特征在于，所述竹节虾虾头ACE抑制肽的氨基酸序为His-Ala-Phe。

2.一种如权利要求1所述的竹节虾虾头ACE抑制肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)原料预处理：将竹节虾虾头清洗干净，去除脂质成分，匀浆绞成浆液备用；

(2)超声波辅助酶解：向上述浆液加入超纯水制成溶液，料液比为1:6～14w/v，调节pH值至6～8，加入菠萝蛋白酶，加酶量为2000～6000U/g，45～65℃下超声波辅助酶解20～60min，酶解结束后，沸水灭活，离心取上清液得酶解溶液；

(3)超滤处理：将上述酶解溶液经微滤后，接着超滤分离后得分子量大于1kDa组和分子量小于1kDa组的两个组分，冻干后分别测定各组分的ACE抑制活性；

(4)离子交换柱处理：在滤膜超滤分离后获得的各组中，选取ACE抑制活性最强的组组分加超纯水配制成溶液，经DEAE-Sephadex离子交换柱分离纯化，收集各峰，冻干后测定各组的ACE抑制活性；

(5)凝胶柱处理：在离子交换柱分离后获得的各组中，选取ACE抑制活性最强的组分加超纯水配制成溶液，脱盐后，经Sephadex G-25凝胶柱分离纯化，收集各峰，冻干后测定各组的ACE抑制活性；

(6)反相高效液相色谱处理：在凝胶柱分离后获得的各组中，选取ACE抑制活性最强的组分加水配制成溶液，经滤膜过滤后用反相高效液相进行分离纯化，收集各洗脱峰，浓缩后分别测定各组的ACE抑制活性，其中ACE抑制活性最强的组即为所需的竹节虾虾头ACE抑制肽。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，超声频率为10～30kHz。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，洗脱液为超纯水，流速为1.0mL·min^-1。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中，反相高效液相色谱的色谱条件为：采用C₁₈色谱柱4.6×250mm5μm，A相为含0.1％三氟乙酸的乙腈，B相为含0.1％三氟乙酸的超纯水，柱温25℃，流速1.0mL·min^-1，洗脱过程为：0％～100％B洗脱8min，15％～85％B洗脱17min，30％～70％B洗脱10min，0％～100％B洗脱5min。

6.一种提高如权利要求1所述的竹节虾虾头ACE抑制肽在生物体内稳定性的方法，其特征在于包括以下步骤，将所述竹节虾虾头ACE抑制肽和鸡卵清蛋白分别配置成同浓度的溶液，在配置的竹节虾虾头ACE抑制肽溶液中加入鸡卵清蛋白溶液，且鸡卵清蛋白溶液与该竹节虾虾头ACE抑制肽溶液的体积比为1:4～6。