[发明专利]超临界流体技术制备软组织去细胞基质的方法在审
申请号: | 201710412419.1 | 申请日: | 2017-06-02 |
公开(公告)号: | CN107164298A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 曾晨光;梁丽金;杨习锋;全大萍 | 申请(专利权)人: | 广州新诚生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 510000 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 临界 流体 技术 制备 软组织 细胞 基质 方法 | ||
1.一种软组织去细胞基质的制备方法,其特征在于,该方法包括:使用超临界流体技术制备软组织去细胞基质,所述软组织为天然软组织,所述天然软组织包括小肠组织,血管组织,肌肉组织,心脏组织,瓣膜组织,肺组织,脾脏组织,肾脏组织,肝脏组织,胃组织,胆囊组织,脂肪组织,软骨组织,气管组织,食道组织,膀胱组织,输尿管组织,输卵管组织或子宫组织。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,该方法具体包括预处理,消毒,去细胞,漂洗和灭菌步骤。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述预处理为在4-10℃条件下,除去所述软组织中的杂质组织,洗净待用。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述消毒为用过氧乙酸溶液、乙醇溶液和新洁尔灭中的一种振荡浸泡或几种混合后振荡浸泡经过预处理的软组织,再用生理盐水或磷酸盐缓冲溶液或去离子水漂洗至pH为中性。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述过氧乙酸溶液的浓度为0.01-0.1wt%;所述乙醇溶液的浓度为1-10%;所述新洁尔灭的浓度为0.05-1wt%;所述浸泡时间为0.5-24h。
6.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述去细胞和漂洗均采用超临界CO2流体处理。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述去细胞步骤的流体处理的条件为:处理的时间为0.5-24h,处理的压强为8-40MPa,处理的温度为33-40℃,处理后的泄压速度为0.1-1MPa/min。
8.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述去细胞步骤的流体处理过程中加入甲醇、无水乙醇、三氟乙醇和丙酮中的一种或多种极性溶剂作为夹带剂,所述夹带剂体积为所述软组织总体积的1-100倍。
9.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述漂洗步骤的流体处理的条件为:处理的时间为6-48h,处理的压强为8-40MPa,处理的温度为33-40℃,处理后的泄压速度为0.1-1MPa/min;所述漂洗步骤的流体处理过程中加入浓度为0.5-10wt%的三羟甲基氨基甲烷溶液或无水乙醇作为夹带剂,夹带剂的体积为组织体积的1-100倍。
10.如权利要求1至9任一项所述的方法制备的软组织去细胞基质。
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