[发明专利]一种用于肿瘤治疗的多孔纳米碳纤维基载药光热试剂及其制备方法

权利要求书

1.多孔纳米碳纤维基载药光热试剂的制备方法，其特征是，具体制备步骤如下：

(1)将多孔纳米碳纤维以0.1mg/mL的浓度分散在70℃的浓硫酸/浓硝酸中4h，其中浓硫酸与浓硝酸的体积比为3:1，冷却到室温后投入去离子水中并不断搅拌，使用高速离心机以9000rpm的转速离心5min，去掉上清液，并用去离子水不断清洗直至上清液pH为中性得到表面酸化的多孔纳米碳纤维；

(2)将表面酸化的多孔纳米碳纤维分散在浓度为2mg/mL的壳聚糖溶液中，壳聚糖的分子量为190kDa，脱乙酰度为75％，表面酸化的多孔纳米碳纤维与壳聚糖的质量比为1:1，在室温下持续搅拌2h后，分散液以9000rpm转速离心10min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的壳聚糖得到洗涤后的沉淀；

(3)将洗涤后的沉淀投入与壳聚糖溶液等浓度且等体积的海藻酸钠溶液中，海藻酸钠的分子量为32kDa，在室温下持续搅拌2h后，分散液以9000rpm转速离心10min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的海藻酸钠，得到层层自组装表面修饰的多孔纳米碳纤维；

(4)将多孔纳米碳纤维分散于生理盐水中，制成0.5mg/mL的多孔纳米碳纤维的分散液，将药物溶于去离子水，制成0.5mg/mL的阿霉素水溶液，将两溶液等体积混合后经过以50KHz的功率超声处理30min充分分散后，在室温且避光条件下放置6h后离心清洗，最后在-50℃下冷冻干燥10h得到多孔纳米碳纤维基载药光热试剂；

或者，具体制备步骤如下：

(1)将多孔纳米碳纤维以5mg/mL的浓度分散在60℃的浓硫酸/浓硝酸中5h，其中浓硫酸与浓硝酸的体积比为4:1，冷却到室温后投入去离子水中并不断搅拌，使用高速离心机以8000rpm的转速离心10min，去掉上清液，并用去离子水不断清洗直至上清液pH为中性得到表面酸化的多孔纳米碳纤维；

(2)将表面酸化的多孔纳米碳纤维分散在浓度为5mg/mL的壳聚糖溶液中，壳聚糖的分子量为370kDa，脱乙酰度为95％，表面酸化的纳米碳纤维与壳聚糖的质量比为1:10，在室温下持续搅拌1h后，分散液以10000rpm转速离心5min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的壳聚糖得到洗涤后的沉淀；

(3)将洗涤后的沉淀投入与壳聚糖溶液等浓度且等体积的海藻酸钠溶液中，海藻酸钠的分子量为250kDa，在室温下持续搅拌1h后，分散液以10000rpm转速离心5min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的海藻酸钠，得到层层自组装表面修饰的多孔纳米碳纤维；

(4)将多孔纳米碳纤维分散于乙醇溶液，制成0.25mg/mL的多孔纳米碳纤维的分散液，将药物溶于乙醇，制成0.25mg/mL的紫杉醇乙醇溶液，将两溶液等体积混合后经过以50KHz的功率超声处理25min充分分散后，在室温且避光条件下放置24h后离心清洗，最后在-48℃下冷冻干燥10h得到多孔纳米碳纤维基载药光热试剂；

或者，具体制备步骤如下：

(1)将纳米碳纤维以2.5mg/mL的浓度分散在80℃的浓硫酸/浓硝酸中3h，其中浓硫酸与浓硝酸的体积比为2:1，冷却到室温后投入去离子水中并不断搅拌，使用高速离心机以10000rpm的转速离心7.5min，去掉上清液，并用去离子水不断清洗直至上清液pH为中性得到表面酸化的多孔纳米碳纤维；

(2)将表面酸化的多孔纳米碳纤维分散在浓度为1mg/mL的壳聚糖溶液中，壳聚糖的分子量为280kDa，脱乙酰度为85％，表面酸化的多孔纳米碳纤维与壳聚糖的质量比为1:5，在室温下持续搅拌1.5h后，分散液以8000rpm转速离心7.5min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的壳聚糖得到洗涤后的沉淀；

(3)将洗涤后的沉淀投入与壳聚糖溶液等浓度且等体积的海藻酸钠溶液中，海藻酸钠的分子量为141kDa，在室温下持续搅拌1.5h后，分散液以8000rpm转速离心7.5min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的海藻酸钠，得到层层自组装表面修饰的多孔纳米碳纤维；

(4)将多孔纳米碳纤维分散于磷酸缓冲溶液，制成1mg/mL的多孔纳米碳纤维的分散液，将药物溶于水，制成1mg/mL的顺铂水溶液，将两溶液等体积混合后经过以55KHz的功率超声处理28min充分分散后，在室温且避光条件下放置15h后离心清洗，最后在-50℃下冷冻干燥11h得到多孔纳米碳纤维基载药光热试剂；

或者，具体制备步骤如下：

(1)将多孔纳米碳纤维以0.5mg/mL的浓度分散在68℃的浓硫酸/浓硝酸中3.5h，其中浓硫酸与浓硝酸的体积比为2.4:1，冷却到室温后投入去离子水中并不断搅拌，使用高速离心机以8800rpm的转速离心6min，去掉上清液，并用去离子水不断清洗直至上清液pH为中性得到表面酸化的多孔纳米碳纤维；

(2)将表面酸化的多孔纳米碳纤维分散在浓度为3mg/mL的壳聚糖溶液中，壳聚糖的分子量为200kDa，脱乙酰度为79％，表面酸化的纳米碳纤维与壳聚糖的质量比为1:3，在室温下持续搅拌1.2h后，分散液以8800rpm转速离心7min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的壳聚糖得到洗涤后的沉淀；

(3)将洗涤后的沉淀投入与壳聚糖溶液等浓度且等体积的海藻酸钠溶液中，海藻酸钠的分子量为200kDa，在室温下持续搅拌1.8h后，分散液以9000rpm转速离心8min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀去除多余的海藻酸钠，得到层层自组装表面修饰的多孔纳米碳纤维；

(4)将多孔纳米碳纤维分散于生理盐水溶液，制成0.4mg/mL的多孔纳米碳纤维的分散液，将药物溶于水，制成0.4mg/mL的抗肿瘤药物水溶液，抗肿瘤药物为阿霉素与顺铂质量比1：1的混合物，将两溶液等体积混合后经过以50KHz的功率超声处理32min充分分散后，在室温且避光条件下放置12h后离心清洗，最后在-44℃下冷冻干燥10h得到多孔纳米碳纤维基载药光热试剂；

或者，具体制备步骤如下：

(1)将多孔纳米碳纤维以4mg/mL的浓度分散在75℃的浓硫酸/浓硝酸中4.5h，其中浓硫酸与浓硝酸的体积比为3:1，冷却到室温后投入去离子水中并不断搅拌，使用高速离心机以9300rpm的转速离心5min，去掉上清液，并用去离子水不断清洗直至上清液pH为中性得到表面酸化的多孔纳米碳纤维；

(2)将表面酸化的多孔纳米碳纤维分散在浓度为4mg/mL的壳聚糖溶液中，壳聚糖的分子量为300kDa，脱乙酰度为78％，表面酸化的纳米碳纤维与壳聚糖的质量比为1:6，在室温下持续搅拌1h后，分散液以9200rpm转速离心9min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的壳聚糖得到洗涤后的沉淀；

(3)将洗涤后的沉淀投入与壳聚糖溶液等浓度且等体积的海藻酸钠溶液中，海藻酸钠的分子量为240kDa，在室温下持续搅拌2h后，分散液以9200rpm转速离心9min得到沉淀，然后用去离子水洗涤沉淀以去除多余的海藻酸钠，得到层层自组装表面修饰的多孔纳米碳纤维；

(4)将多孔纳米碳纤维分散于乙醇，制成0.8mg/mL的多孔纳米碳纤维的分散液，将药物溶于水，制成0.8mg/mL的抗肿瘤药物水溶液，抗肿瘤药物为阿霉素与紫杉醇质量比为1：1的混合物，将两溶液等体积混合后经过以50KHz的功率超声处理28min充分分散后，在室温且避光条件下放置14h后离心清洗，最后在-47℃下冷冻干燥8h得到多孔纳米碳纤维基载药光热试剂。