[发明专利]一种基于ZnTCPP@MOF的电化学免疫检测微囊藻毒素的方法有效
申请号: | 201710413037.0 | 申请日: | 2017-06-05 |
公开(公告)号: | CN107290412B | 公开(公告)日: | 2019-09-13 |
发明(设计)人: | 邓盛元;宋宏鑫;姚传广;郑晨昱;崔宏达 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | G01N27/30 | 分类号: | G01N27/30;G01N21/76 |
代理公司: | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人: | 刘海霞 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 zntcpp mof 电化学 免疫 检测 微囊藻 毒素 方法 | ||
1.一种基于ZnTCPP@MOF的电化学免疫检测微囊藻毒素的方法,其特征在于,具体步骤如下:
步骤1,ZnTCPP@MOF的制备:将均苯三酸和锌卟啉加入到等体积的无水乙醇和N,N-二甲基甲酰胺的混合溶剂中,搅拌至分散均匀,加入Cu(NO3)2·3H2O溶液,混合均匀后置于60~120℃进行水热反应,反应结束后,冷却至常温,离心,弃去上清液,真空干燥即得到锌卟啉功能化金属有机框架材料ZnTCPP@MOF;
步骤2,传感器组装:按锌卟啉功能化金属有机框架物ZnTCPP@MOF和四辛基溴化铵的质量比为1:1,将ZnTCPP@MOF和四辛基溴化铵溶于甲苯中,将混合溶液滴加到洁净的电极表面,常温下干燥,滴加摩尔比为4:1的EDC/NHS的水溶液对框架物进行羧基活化,淋洗,滴加待检测的微囊藻毒素LR,温育淋洗后滴加抗微囊藻毒素LR单克隆抗体,进行免疫反应,温育淋洗,即组装得到电化学免疫传感器;
步骤3,电致化学发光检测:以铂丝电极为对电极,Ag/AgCl电极为参比电极,步骤2中的电极为工作电极,以含有0.1M KNO3的0.1M,pH 7.4的PBS为电解液,检测ECL信号强度,根据微囊藻毒素LR的浓度和ECL信号的线性关系,计算得到待检测的微囊藻毒素LR的浓度,所述的电致化学发光参数为:光电倍增管偏置电压为1kV,放大级数为3,扫描电位范围为-1.7~-0.5V,扫描速率为100mV·s-1。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1中,所述的水热反应时间为6~12h;离心的转速为9000r/min,离心时间为10~20min;真空干燥的温度为60~80℃,干燥时间为12~24h。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2中,温育条件为37℃下温育1h。
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